MethyTect Taq HS PCR试剂盒 (用于重亚硫酸盐处理后的基因组 DNA)

¥1,800.00

货号AG11209
分类表观遗传系列、DNA甲基化

产品详情

产品描述

本制品是专门针对重亚硫酸盐修饰后含有尿嘧啶的基因组 DNA 进行 PCR 扩增的产品。经过重亚硫酸盐处理后的基因组 DNA,未甲基化的胞嘧啶 (C) 转化成尿嘧啶 (U),而甲基化的胞嘧啶 (5-mC 或 5-hmC)不会发生转化,进而可以通过 PCR 扩增或测序判断出 DNA 甲基化的情况。重亚硫酸盐修饰后的 DNA 有时会影响 PCR 反应性能,本制品对 DNA Polymerase、反应 buffer 进行优化使其适合于重亚硫酸盐修饰后的基因组 DNA 的扩增。对于比较难扩增的目的片段,可通过调整 Mg2+ 或 dNTP 的浓度来调节扩增效率和反应特异性。

本制品中添加了在常温状态下能够抑制 DNA polymerase 活性的单克隆抗体,可以进行 Hot Start PCR,有效的抑制引物二聚体的形成及非特异性扩增。抗体在 PCR 反应最初的 DNA 变性步骤已变性,在常规的 PCR 反应条件下即可使用。

产品优势

① 重亚硫酸盐修饰后的 DNA 有时会影响PCR反应性能,本制品对 DNA Polymerase、反应 buffer 进行优化使其适合于重亚硫酸盐修饰后的基因组 DNA 的扩增。
② 本制品含有所有必要的用于 PCR 反应的试剂,每个组分单独包装,便于调整 MgCl2 及 dNTPs 的反应浓度,获得最佳的实验结果。
③ 本品中添加了能够抑制 Taq 酶活性的单克隆抗体,可以进行热启动反应。在进行 PCR 反应前,抗体与酶结合抑制 Taq 酶的活性,有效抑制引物二聚体的形成及非特异性扩增。

产品组成
组分 规格
MethyTect Taq HS DNA Polymerase (5U / μl) 50μl
10X MethyTect PCR Buffer (Mg2+ free) 1ml
dNTP Mix (10mM each) 300μl
MgCl2 Solution (50mM) 600μl
保存与运输
保存温度:-20℃
运输温度:干冰或-20℃冰袋运输

实验示例

示例一

以重亚硫酸盐处理后的鸡心 gDNA 为模板,用本试剂盒扩增不同长度的 DNA 片段。

反应程序:

电泳图结果如下图所示:

示例二

以重亚硫酸盐处理后的水稻、芦荟 gDNA 为模板,用本试剂盒扩增不同长度的 DNA 片段。

反应程序:

电泳图结果如下图所示:

示例三

以重亚硫酸盐处理后的 HL60 gDNA 为模板,用本试剂盒扩增 522bp 的 DNA 片段,模板加入量为 100ng、10ng、1ng、100pg。

反应程序:

电泳图结果如下图所示:

 

产品说明书

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