产品详情
产品描述
AdeptTect Flash HS PCR Master Mix ( dye plus ) 是适用于快速 PCR 反应的 2 倍浓度预混型制品,具有超快的延伸速度(可达 5sec/kb );同时,本制品还具有高扩增效率、高灵敏度、高特异性、高退火效率等特点。本制品中含有电泳所必需的色素试剂(蓝色和黄色色素),制品溶液呈现鲜艳的绿色;使用本制品时,只需要在溶液中加入模板、引物和水便可以进行 PCR 反应;PCR 反应后可直接进行电泳,操作便捷,可最大限度地减少人为误差,并在较短时间内即可获得检测结果。此外,本制品中还添加了在常温状态下能够抑制 DNA Polymerase 活性的单克隆抗体,可以进行 Hot Start PCR,有效抑制引物二聚体的形成及非特异性扩增。
本制品扩增得到的产物 3’ 端不含 A 碱基,因此不可用于 TA 克隆。
产品优势
① 本制品具有高扩增效率、高灵敏度、高特异性、高退火效率及延伸速度快等特点,可提高 PCR 扩增效率。
② 本制品具有超快的延伸速度(可达 5sec/kb )。
③ 本制品为 2X 预混液,加入模板、引物和水即可进行 PCR 反应,操作简便,可最大限度地减少人为误差。
④ 本制品含有电泳所必需的色素试剂(蓝色和黄色色素),PCR 反应后可以直接进行电泳,在较短时间内即可获得检测结果。
产品组成
组分
规格
2X Flash HS PCR Master Mix ( dye plus )
500μl x 6pc
保存与运输
保存温度:-20℃
运输温度:干冰或者 -20℃ 冰袋
实验示例
示例一
以 Human gDNA 为模板,采用本试剂盒以不同的延伸速度扩增不同长度的 DNA 片段,能以 10sec 的延伸时间扩增出 4kb DNA 片段。
反应程序(理论时长12.5min) :
电泳结果如下图所示:
示例二
以 Human Total RNA 反转录获得的 cDNA 为模板,扩增不同长度的 DNA 片段。
4kb DNA 片段的反应程序(理论时长16min):
10kb DNA 片段的反应程序(理论时长56min):
13kb DNA 片段的反应程序(理论时长68.5min):
电泳结果如下图所示:
示例三
挑取 E.coli 单菌落加入至 20μl RNase free water 中,混匀后取 1μl 菌液为模板,扩增不同长度的 DNA 片段,能以 3sec/kb 扩增出 7kb DNA 片段。
反应程序:
电泳结果如下图所示:
示例四
以 Human gDNA 为模板,添加不同模板量(500ng、300ng、100ng、10ng、1ng、100pg),采用本试剂盒扩增 4kb DNA 片段,模板量低至 1ng 时,能以 5sec/kb 的延伸速度扩增出目的片段。
反应程序(理论时长17.5min):
电泳结果如下图所示:
示例五
以 λDNA 为模板,添加不同模板量(5ng、1ng、100pg、10pg、1pg、100fg),采用本试剂盒扩增 4kb DNA 片段,模板量低至 100fg 时,能以 5sec/kb 的延伸速度扩增出目的片段。
反应程序(理论时长17.5min):
电泳结果如下图所示:
示例六
以 Human gDNA(泳道1~2)为模板,可扩增 17.5 kb 的 DNA 片段;以 λDNA(泳道3~6)为模板,能够很好地扩增 40 kb 的 DNA 片段。
反应程序 :
电泳结果如下图所示:
实验例表
模板类型
扩增速度
片段大小(kb)
序列GC含量
模板提取方式
模板量
能否扩增
Human gDNA
30 sec /kb
0.5 kb
75.4%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
5 sec /kb
1 kb
36.1%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
5 sec /kb
2 kb
38.1%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
1 min/kb
2.1 kb
26.9%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
4 sec /kb
3 kb
38.7%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
2.5 sec /kb
4 kb
36.0%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
10 sec /kb
6 kb
40.0%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
15 sec /kb
7.5 kb
37.1%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
15 sec /kb
10 kb
37.7%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
15 sec /kb
12 kb
40.0%
试剂法
100 ng
√
Human gDNA
15 sec /kb
17.5 kb
37.4%
试剂法
100 ng
√
Mouse gDNA
5 sec /kb
1 kb
52.2%
磁珠法
100 ng
√
Mouse gDNA
5 sec /kb
2.6 kb
65.2%
磁珠法
100 ng
√
Mouse gDNA
5 sec /kb
3.4 kb
53.4%
磁珠法
100 ng
√
Mouse gDNA
5 sec /kb
4 kb
49.8%
磁珠法
100 ng
√
Mouse gDNA
15 sec /kb
5 kb
49.8%
磁珠法
100 ng
√
Mouse gDNA
15 sec /kb
11 kb
51.6%
磁珠法
100 ng
√
Chicken gDNA
5 sec /kb
0.5 kb
41.0%
磁珠法
74 ng
√
Chicken gDNA
5 sec /kb
1.2 kb
36.6%
磁珠法
74 ng
√
Chicken gDNA
5 sec /kb
1.7 kb
68.6%
磁珠法
74 ng
√
Chicken gDNA
5 sec /kb
2.4 kb
49.4%
磁珠法
74 ng
√
Pig gDNA
5 sec /kb
0.6 kb
47.6%
磁珠法
30 ng
√
Pig gDNA
5 sec /kb
0.8 kb
50.2%
磁珠法
30 ng
√
Pig gDNA
5 sec /kb
2 kb
57.9%
磁珠法
30 ng
√
Pig gDNA
5 sec /kb
2.9 kb
37.7%
磁珠法
30 ng
√
Pig gDNA
10 sec /kb
6 kb
59.3%
磁珠法
30 ng
√
Potato gDNA
5 sec /kb
1.3 kb
39.5%
柱式法
50 ng
√
Potato gDNA
5 sec /kb
2 kb
39.6%
柱式法
50 ng
√
Potato gDNA
5 sec /kb
2.9 kb
38.2%
柱式法
50 ng
√
Potato gDNA
10 sec /kb
5.8 kb
35.4%
柱式法
50 ng
√
Potato gDNA
10 sec /kb
10 kb
38.0%
柱式法
50 ng
√
Tomato gDNA
5 sec /kb
0.5 kb
28.2%
磁珠法/柱式法
120 ng
√
Tomato gDNA
5 sec /kb
1.6 kb
32.2%
磁珠法/柱式法
120 ng
√
Tomato gDNA
5 sec /kb
1.9 kb
36.0%
磁珠法/柱式法
120 ng
√
Tomato gDNA
5 sec /kb
3 kb
37.4%
磁珠法/柱式法
120 ng
√
Tomato gDNA
5 sec /kb
4.4 kb
37.6%
磁珠法/柱式法
120 ng
√
Tomato gDNA
5 sec /kb
5 kb
38.2%
磁珠法/柱式法
120 ng
√
Rice gDNA
5 sec /kb
1 kb
45.6%
磁珠法/柱式法
100 ng/200 ng
√
Rice gDNA
5 sec /kb
3 kb
41.5%
磁珠法/柱式法
100 ng/200 ng
√
Rice gDNA
5 sec /kb
5 kb
40.5%
磁珠法/柱式法
100 ng/200 ng
√
Rice gDNA
10 sec /kb
7.5 kb
46.8%
磁珠法/柱式法
100 ng/200 ng
√
Rice gDNA
10 sec /kb
12 kb
44.6%
磁珠法/柱式法
100 ng/200 ng
√
λDNA
20 sec /kb
30 kb
51.1%
–
2 ng
√
大肠杆菌菌落
5 sec /kb
1 kb
53.8%
/
单菌落
√
大肠杆菌菌落
5 sec /kb
2 kb
51.1%
/
单菌落
√
大肠杆菌菌落
5 sec /kb
3.5 kb
52.2%
/
单菌落
√
大肠杆菌菌落
5 sec /kb
5 kb
53.2%
/
单菌落
√
大肠杆菌菌落
10 sec /kb
6.7 kb
51.8%
/
单菌落
√
大肠杆菌菌落
10 sec /kb
11 kb
50.7%
/
单菌落
√
注:√表示能够扩增,/表示未提取。-表示直接购买。