SteadyPure 通用型基因组 DNA 提取试剂盒

¥400.00¥1,800.00

货号AG21009 / AG21010
分类核酸纯化系列、DNA提取

产品详情

产品描述

SteadyPure 通用型基因组 DNA 提取试剂盒是一种可从多种样本中快速、简便提取基因组 DNA 的产品。使用本试剂盒提取所得的基因组 DNA 溶解于水或者 Tris 缓冲液中,可直接用于 PCR 扩增、DNA 序列分析等。

产品组成
组分 AG21009 AG21010
Proteinase K (20mg / ml)*1 1ml 1ml x 5
RNase A (10mg / ml)*1 500μl 500μl x 5
Buffer LS-2 9ml 45ml
Buffer BS-2 10ml 50ml
Buffer WA 25ml 125ml
Buffer WB*2 27ml 135ml
Elution Buffer 20ml 62.5ml
Universal DNA Mini Columns 50套 125sets x 2
Collection tubes 50支 125sets x 2

* 1 此两种组分包装于 Package 2-1中,需放置于 -20℃ 保存;其余组分均包装于 Package 2-2  中,室温(15-25℃) 保存。
* 2 Buffer WB 在首次使用前,请添加 63 ml的 100% 乙醇(Buffer WB 与无水乙醇体积比为 3:7),混合均匀后在瓶子上做好标记,室温下保存。

保存与运输

保存温度:
Package 2-1 于 -20℃ 保存;其中 Lysozyme (20mg / ml) 融化后请于 4℃ 长期保存。
Package 2-2 室温(15-25℃)保存(温度较低时有的组分会出现沉淀,使用前可以 37℃ 加热直至沉淀消失,然后使用)

运输温度:
Package 2-1 使用干冰或 -20℃ 冰袋运输;
Package 2-2 于室温运输。

实验示例

示例一

从小鼠肌肉组织中提取 gDNA 的实验案例:

结果:使用本试剂盒处理 10mg 小鼠肌肉组织,分别水浴15min、30min、1h、2h、3h,纯化得到 2~8μg 高纯度 gDNA,其电泳结果见下图:

示例二

从小鼠尾中提取 gDNA 的实验案例:
结果:使用本试剂盒处理小鼠尾组织,分别水浴 15min、30min、60min,都能纯化得到约 15μg 高纯度的 gDNA,其电泳结果如下图:

样本用量及样本得率表
样本品名 研磨方法 上样量 裂解15min收量(μg) 裂解30min收量(μg) 裂解60min收量(μg)
小鼠肝脏 组织匀浆仪 10mg ~5 ~6 ~5
小鼠心脏 组织匀浆仪 10mg ~3 ~4 ~5
小鼠脾脏 组织匀浆仪 5mg ~7 ~9 ~11
小鼠肺脏 组织匀浆仪 10mg ~6 ~5 ~5
小鼠肾脏 组织匀浆仪 10mg ~5 ~6 ~7
小鼠脑 组织匀浆仪 10mg ~4 ~4 ~5
小鼠肠 组织匀浆仪 10mg ~5 ~5 ~7
小鼠胃 组织匀浆仪 10mg ~3 ~3 ~4
小鼠肌肉 组织匀浆仪 10mg ~2 ~3 ~3(裂解2~3h可达8μg)
小鼠尾 组织匀浆仪 10mg ~14 ~16 ~16
小鼠耳 组织匀浆仪 10mg ~6 ~7 ~9
小鼠胸腺 组织匀浆仪 5mg ~2 ~2 ~3
小鼠眼球 组织匀浆仪 5mg ~3 ~3 ~3
活虾 组织匀浆仪 10mg ~2 ~2 ~2
新鲜蟹肉 组织匀浆仪 10mg ~2 ~2 ~2
新鲜鲫鱼肉 组织匀浆仪 10mg ~4 ~5 ~5
紫菜 组织匀浆仪 50mg ~2 ~3 ~2
小鼠血 N/A 200μl ~3 N/A N/A
人血 N/A 200μl ~3 N/A N/A

产品说明书

Q1:DNA 收量低

Answer: ① 选择合适的上样量(样本使用量过多或过少都会导致 DNA 收量低);尽量将组织切碎,并要保证材料完全浸泡在裂解液中。
② 确认裂解样本时是否已经加入了 Proteinase K 溶液。
③ 过柱前检查裂解液是否清亮,如果组织裂解后过于粘稠,可再次添加相同体积的 Buffer LS-2、 Proteinase K 和 RNase A,继续裂解;避免 Mini Columns 出现堵柱。
④ 检查 Buffer WB 在首次使用前是否添加了无水乙醇。
⑤ 洗脱 DNA 时,洗脱液应尽量加到离心柱的中央,可将 Elution Buffer 或灭菌水加热至 50 - 65℃ 使用,以提高 DNA 的洗脱效率。
⑥ 避免在实验操作过程中带入外源 DNase 污染导致 DNA 降解。
⑦ 根据样本类型选择对应的试剂盒。

Q2:DNA 中有 RNA 污染

Answer: 可在样品材料裂解过程中添加适量的 RNase A 降解 RNA。

Q3:DNA 纯度不好

Answer: 纯化的 DNA 中有有机试剂残留:在洗涤步骤中可能会残留有机试剂,加入洗脱液之前应将离心柱空离心 2 - 3 分钟,可适当晾干彻底干燥离心柱;使用正确的洗涤操作步骤,确认 Buffer WB 及Buffer WA 的添加顺序,并确认 Buffer WB 中已经加入了指定体积的 100% 乙醇。

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