本制品中 SYBR® Green 浓度、PCR 反应体系都进行了优化,使其特异性强、PCR 扩增效率高,可以进行高灵敏度的 Real Time PCR 反应,可以在宽广的定量区域内得到良好的工作曲线,从而对靶基因进行准确定量检测。
产品优势
① 2X Premix 中添加了蓝色染料,搭配黄色模板稀释液,实现移液过程可视化,提高加样效率,降低误操作概率。
② 本制品是一种 2X 预混液,预先混有 SYBR® Green,反应液配制十分简单,仅需加入引物、模板及 RNase Free Water 即可进行 qPCR 反应。
③ 本制品对 SYBR® Green 浓度及 PCR 反应体系进行了优化,具有扩增效率高、扩增特异性强等特点。
产品组成
组分
规格
2X SYBR® Green Pro Taq HS Premix II(Blue)
1 ml x 5 pcs
40X Dilution Buffer(Yellow)
500 μl
保存与运输
保存温度:-20℃(避光保存)
运输温度:-20℃ 冰袋或干冰运输
实验示例
示例一
采用本试剂盒进行荧光定量 RT-PCR 检测 Human βActin Gene(GC 含量 58.7%),cDNA 模板添加量(相当于 Total RNA 量)为 10 ng ~ 1 pg。cDNA 的合成使用本公司的 Evo M-MLV 反转录预混型试剂盒(含去除 gDNA 试剂,用于 qPCR)(Code.AG11728)。 所用定量仪器:ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。结果如下:
结果如上图所示:
①工作曲线 R2=0.9998,扩增效率 96.8%。
②可以在宽广的模板范围内进行准确的定量,10 ng ~ 1 pg cDNA 浓度(相当于 Total RNA 量)范围内扩增曲线呈现良好的线性关系。
③熔解曲线峰型单一、无杂峰,扩增特异性强。
示例二
采用本试剂盒进行荧光定量 RT-PCR 方法检测 Human TRF Gene(GC 含量 40.8%),模板 cDNA 添加量(相当于 Total RNA 量)为 10 ng ~ 1 pg。cDNA 的合成使用本公司的 Evo M-MLV 反转录预混型试剂盒(含去除 gDNA 试剂,用于 qPCR)(Code.AG11728)。所用定量仪器:CFX96 Real-Time PCR Detection System。结果如下: