本制品是采用 SYBR® Green 嵌合荧光法进行 qPCR 的专用试剂,2X Premix 中添加了蓝色染料,搭配黄色模板稀释液,实现移液过程可视化:将黄色稀释液与模板混匀后,加入到蓝色的反应液中,溶液会从蓝色变成绿色,可根据颜色变化确认是否添加模板,有利于大量样品的加样,减少了误操作概率。
本制品中 SYBR® Green 浓度、PCR 反应体系都进行了优化,采用了反应性能优越的 Pro Taq HS 体系(混合了 Taq 抗体),能够有效抑制非特异性扩增,提高 PCR 扩增效率,可以进行高灵敏度的 Real Time PCR 反应,可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,从而对靶基因进行准确定量、检测。
产品优势
① 2X Premix 中添加了蓝色染料,搭配黄色模板稀释液,实现移液过程可视化,提高加样效率,降低误操作概率。
② 本制品是一种 2X 预混液,预先混有 SYBR® Green I,反应液配制十分简单,仅需加入引物、模板及 RNase free water 即可进行 qPCR 反应。
③ 本制品对 SYBR® Green I 浓度及 PCR 反应体系进行了优化,具有扩增效率高、扩增特异性强等特点。
产品组成
组分
规格
2X SYBR® Green Pro Taq HS Premix(Blue)
1 ml x 5 pc
40X Dilution Buffer(Yellow)
500 μl
保存与运输
保存温度:-20℃(避光保存)
运输温度:干冰运输
实验示例
示例一
采用本试剂盒进行荧光定量 RT-PCR 检测 Mouse Hnf4a Gene(GC 含量 0%),cDNA 模板添加量(相当于 Total RNA 量)为 100 ng ~ 1 pg。cDNA 的合成使用本公司的 Evo M-MLV 反转录试剂盒 Ⅱ(含去除 gDNA 试剂,用于 qPCR)(Code.AG11711)。所用定量仪器:ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。结果如下:
结果如上图所示:
①工作曲线 R2=0.9958,扩增效率 95.26%。
②可以在宽广的模板范围内进行准确的定量,100 ng ~ 1 pg cDNA 浓度(相当于 Total RNA 量)范围内扩增曲线呈现良好的线性关系。
③熔解曲线峰型单一、无杂峰,扩增特异性强。
示例二
采用本试剂盒进行荧光定量 RT-PCR 方法检测 Human β-Actin Gene(GC 含量 2%),模板 cDNA 添加量(相当于 Total RNA 量)为 10 ng ~ 100 fg。cDNA 的合成使用本公司 Evo M-MLV 反转录试剂盒 Ⅱ(含去除 gDNA 试剂,用于 qPCR)(Code.AG11711)。结果如下:所用定量仪器:CFX96 Real-Time PCR Detection System。
结果如上图所示:
①工作曲线 R2=0.9994,扩增效率 96.21%。
②可以在宽广的模板范围内进行准确的定量,10 ng ~ 100 fg cDNA 浓度(相当于 Total RNA 量)范围内扩增曲线呈现良好的线性关系。
③熔解曲线峰型单一、无杂峰,扩增特异性强。
示例三
采用本试剂盒进行荧光定量 RT-PCR 检测 Human PARP1 Gene (GC 含量 4%),cDNA 模板添加量 (相当于 Total RNA 量)为 10 ng ~ 1 pg。cDNA 的合成使用本公司的 Evo M-MLV 反转录试剂盒 Ⅱ(含去除 gDNA 试剂,用于 qPCR)(Code.AG11711)。所用定量仪器:CFX96 Real-Time PCR Detection System。结果如下:
结果如上图所示:
①工作曲线 R2=0.9994,扩增效率 91.74%。
②可以在宽广的模板范围内进行准确的定量,10 ng ~ 1 pg cDNA 浓度(相当于 Total RNA 量)范围内扩增曲线呈现良好的线性关系。
③熔解曲线峰型单一、无杂峰,扩增特异性强。