产品描述
本产品是对 1~1000 Cells 或 10 pg~10 ng 基因组 DNA 进行无差别的全基因组扩增 (Whole Genome Amplification, WGA ) 试剂盒。基于多重置换扩增(Multiple Displacement Amplification, MDA)的等温扩增体系,在 Phi29 DNA 聚合酶的作用下,单细胞全基因组获得的扩增产物大小在 2~100 kb 之间,平均产物大小约为 15 kb,可广泛适用于全基因组和外显子测序、大片段拷贝数变异分析、微卫星分析、qPCR 分析、基因芯片分析等。
本产品中使用了超强扩增性能的 Phi29 DNA聚合酶,具有很强的链置换活性和链亲合力,搭配优化的 Buffer 体系,在 2~2.5 h 能扩增出高覆盖度的 DNA,同样也适用于具有复杂结构的样本。同时,Phi29 DNA 聚合酶具有 3’- 5’的外切酶活性,保证了 DNA 合成的高保真性、准确性。
本产品中使用了超强扩增性能的 Phi29 DNA聚合酶,具有很强的链置换活性和链亲合力,搭配优化的 Buffer 体系,在 2~2.5 h 能扩增出高覆盖度的 DNA,同样也适用于具有复杂结构的样本。同时,Phi29 DNA 聚合酶具有 3’- 5’的外切酶活性,保证了 DNA 合成的高保真性、准确性。
产品优势
1. 室温 ( 15~25℃ ) 下的细胞裂解及基因组 DNA 变性,与高温变性相比,减少了 DNA断裂次数,提高了全基因组扩增的均匀性。
2. 基于 Phi29 DNA 聚合酶的高保真性、超高 DNA 聚合活性及链置换活性,可得到较长的扩增片段(2~100 kb),有利于提高单细胞全基因组覆盖度。
3. 灵敏度高,可在单细胞及 10 pg 基因组 DNA 的水平上对全基因组进行非选择性扩增,较低的扩增偏好性,可获得准确的、均一性良好的、高覆盖度的扩增基因组序列。
4. 操作简单快捷,恒温(30℃)反应 2 h,即可获得大量的 DNA。
2. 基于 Phi29 DNA 聚合酶的高保真性、超高 DNA 聚合活性及链置换活性,可得到较长的扩增片段(2~100 kb),有利于提高单细胞全基因组覆盖度。
3. 灵敏度高,可在单细胞及 10 pg 基因组 DNA 的水平上对全基因组进行非选择性扩增,较低的扩增偏好性,可获得准确的、均一性良好的、高覆盖度的扩增基因组序列。
4. 操作简单快捷,恒温(30℃)反应 2 h,即可获得大量的 DNA。
产品组成
组分 | AG12516 | AG12517 |
Buffer DLS*1 | 250 μl | 1 ml |
Stop Reaction Buffer*2 | 200 μl | 800 μl |
DTT ( 1 M )*1 | 50 μl | 200 μl |
AccuNext WGA Polymerase*3 | 24 μl | 96 μl |
AccuNext WGA Auxiliary Enzyme | 30 μl | 120 μl |
4X WGA Reaction Buffer | 150 μl | 600 μl |
Nuclease free water | 1 ml | 1 ml X 2 pcs |
*1:扩增基因组 DNA 时,需要将 Buffer DLS 配制成 Buffer D1 再使用;扩增细胞时需要将 BufferDLS 与 DTT 配制成 Buffer D2 再使用。具体的配制方法请参照<操作方法>。
*2:扩增基因组 DNA 时,需要将 Stop Reaction Buffer 配制成 Buffer N1 再使用;扩增细胞时直接使用 Stop Reaction Buffer。具体的配制方法请参照<操作方法>。
*3:该组分中含有 Phi29 DNA 聚合酶,避免反复冻融。
保存与运输
保存温度:-20℃ 保存
运输温度:-20℃ 冰袋运输或干冰运输
运输温度:-20℃ 冰袋运输或干冰运输