Evo Super M-MLV 反转录聚合酶 I

产品货号:CM0265

¥1,000

产品描述

Evo Super M-MLV 反转录聚合酶 I 是基于 M-MLV (莫洛尼鼠白血病病毒)进行基因改造的逆转录酶突变体,并通过大肠杆菌重组表达系统纯化获得。
Evo Super M-MLV 反转录聚合酶 I 具有无 RNase H 活性、合成效率高、反应速度快、灵敏度高、热稳定性高、半衰期长和抗抑制能力强等特点。可在 42℃ ~ 55℃ 条件下高效合成 1st Strand cDNA,其最佳的反应温度为 50℃,对于复杂的模板也能很好的进行反转。同时本产品也适合于全长 cDNA 文库的构建等。

 

产品优势

1. 热稳定性强:可在 42℃ ~ 55℃ 条件下进行反转录反应,其最适温度为 50℃,有利于具有复杂二级结构 RNA 模板的合成。
2. 抗抑制能力强:对 RNA 中残留的抑制剂(如异硫氰酸胍、乙醇、EDTA 与血红素等)具有良好的抗性。
3. 使用范围广:适合 cDNA  的合成及全长 cDNA 文库构建。
4. 转录能力强:可合成长达 13 kb 的 cDNA。
5. 转录速度快:最快 5 min 内可完成反转录反应。

产品组成
组分 规格
Evo Super M-MLV RTase I ( 200 U / μl ) 100 μl
5X RTase Reaction Buffer* 800 μl

*:5X RTase Reaction Buffer组成:250 mM Tris-HCl ( pH8.3 at 25℃) , 375 mM KCl , 45 mM MgCl2

保存与运输
保存温度:-20℃保存
运输温度:干冰运输或-20℃冰袋运输
示例1

以 293T 细胞 Total RNA 及 Mouse Heart RNA 为模板,使用本产品进行反转(反应温度为 50℃),后使用 2X L-Exp Taq Master Mix(Code No. AG11417)扩增不同长度的片段,均能得到较好的扩增效果。电泳结果如下图所示:

示例2

以 293T 细胞 Total RNA 为模板(模板量为 1 μg 与 100 ng),使用本产品在不同温度(42℃、50℃、55℃)下进行反转后扩增 2.6 kb,结果表明:Evo Super M-MLV RTase I 在 42℃ ~ 55℃ 温度范围内均能很好的反转,推荐最适反转温度为 50℃。电泳结果如下图所示:

示例3

以 293T Total RNA(100 ng ~ 1 pg)为模板,用 RNase free water 代替模板作为阴性对照,使用本产品进行反转,反转产物搭配 2X Premix Probe qPCR Kit for ASFV (UNG Plus, Primer Free)(Code No. AG11731)进行定量检测(RPP30 基因,GC 含量为 62%,CY5 通道)。所用定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。实验结果如下:

结果如上图所示:
1、不同浓度的模板在 45 cycles 以内均能获得良好的扩增。
2、阴性对照在 45 cycles 没有检出。
3、扩增效率为 100%,R2 =0.9994。