4X 一步法 RT-qPCR 预混型探针法试剂盒（含 UNG）

4X 一步法 RT-qPCR 预混型探针法试剂盒（含 UNG）

产品货号： CM0270

¥1,800

产品描述

本产品是一款适用于探针法进行诺如病毒（Norovirus）检测的专用试剂盒。反转录和 qPCR 反应在同一管内完成，操作简单、快捷，可有效降低污染风险。
本产品采用了反应性能优越的 Evo M-MLV 反转录酶和 Accurate Taq HS DNA 聚合酶，配合精心优化的 Buffer，可以在短时间内合成 cDNA 并进行高效稳定的 qPCR 扩增，非常适合诺如病毒等 RNA 病毒检测。
本产品中还引入了 dUTP/UNG 防污染系统，在 PCR 反应过程中以 dUTP 取代 dTTP，利用 UNG 酶能选择性水解含 dU 的 DNA 链，而对不含 dU 的 DNA 链没有任何影响的特性，除去PCR 反应体系配制过程中引入的含 dU 的污染模板，从而可有效防止 PCR 假阳性结果的产生；同时，本产品中混合了在常温状态下能够抑制 DNA Polymerase 活性的单克隆抗体，能够有效抑制非特异性扩增，提高反应灵敏度，提升结果准确性。

产品优势

1. 本产品是一步法 RT-qPCR 反应试剂盒，可在单管内完成反转录与 qPCR 反应，简化操作，提高效率，可有效地降低因多次操作而造成污染的可能性。
2. 本产品采用了新型耐热（高达 55℃）、延伸能力强的 Evo Super M-MLV 反转录酶和突变型 Accurate Super Taq HS，搭配精心优化的反应体系，具有特异性强、扩增效率高等特点。
3. 本产品灵敏度高，可对个位数拷贝模板稳定检出，并可进行单重或者多重检测。
4. 本产品可以进行 DNA / RNA 共检。
5. 本产品中引入了 dUTP / UNG 防污染系统，可除去含 dU 的 PCR 产物污染，从而有效防止出现 PCR 假阳性结果，提升实验结果的准确性。

产品组成
组分 规格
4X One Step Probe Mixture ( UNG Plus ) 1.25 ml

*：含有 Evo Super M-MLV RTase Enzyme、Accurate Super Taq HS DNA Polymerase、UNG Enzyme 与 RNase Inhibitor 等。

保存与运输
保存温度：-20℃保存
运输温度：干冰运输或-20℃冰袋运输。
示例一

以 293T 细胞 Total RNA (100 ng-10 pg)为模版，用 RNase free water 代替模板作为阴性对照，进行三重检测，分别为 TFR 基因（GC 含量为38%，FAM 通道）、Actin 基因（GC 含量为 59%，HEX 通道），RPP30 基因（GC 含量为 62%，CY5 通道）。所用定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。实验结果如下：

结果如上图所示：
1、不同浓度的模板在 45 cycles 以内均能获得良好的扩增；
2、阴性对照在 45 cycles 内没有检出；
3、扩增效率为 97.4%，R2=0.9965。

结果如上图所示：
1、不同浓度的模板在 45 cycles 以内均能获得良好的扩增；
2、阴性对照在 45 cycles 内没有检出；
3、扩增效率为 93.4%，R2=0.9998。

 

结果如上图所示：
1、不同浓度的模板在 45 cycles 以内均能获得良好的扩增；
2、阴性对照在 45 cycles 内没有检出；
3、扩增效率为 100.1%，R2=0.9980。

 

示例二

以人鼻 C 型 RNA 病毒、人腺 7 型 DNA 病毒、人副流感 1 型 RNA 病毒标准物质为模板进行三重检测， 20 μl 反应体系中, 人鼻 C 型 RNA 病毒模板加入量为 8 copies ，人腺 7 型 DNA 病毒模板加入量为 20 copies、人副流感 1 型 RNA 病毒模板加入量为 1 copy，三种病毒均检测了 8 个复孔，用 RNase free water 代替模板作为阴性对照。所用定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。实验结果如下：

结果如上图所示：
1、本产品对于低拷贝的病毒模板，可以很好的检出，灵敏度高且重复性好。
2、本产品可以同时检测 DNA / RNA 病毒模板。
3、阴性对照在 45 cycles 内没有检出。

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