本产品是针对 Illumina 高通量测序平台定向开发的,基于 CUT & RUN ( Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease ) 技术原理研究蛋白质与 DNA 相互作用的试剂盒。本产品优化了实验反应体系和建库流程,与传统的 ChIP-Seq 相比,具有实验成功率高、抗体兼容性强、实验周期短、操作简单、信噪比高等优势,尤其适用于早期胚胎发育、干细胞、肿瘤发生等表观遗传学研究领域。
CUT & RUN 是一种研究蛋白质 -DNA 相互作用的新方法,使用 Protein A/G 融合的 MNase 核酸酶,在抗体引导下精准靶向定位到目的蛋白,并在目的位点附近进行 DNA 的片段化切割,提取后的 DNA 可直接用于 DNA 文库构建,经测序后即可获得靶标位点的 DNA 信息。
本产品的反应体系经过了精心优化,实验中所有试剂请使用本产品中提供的,不建议改变任何反应组分或用其他的等效产品替换本产品中组分,以免获得不好的实验结果。如需替换,请先进行验证。
1. 操作简单,单管式片段化、末端修复、加dA尾反应,显著缩短实验耗时。
2. DNA适用范围广,灵敏度高,100 pg ~ 1μg的起始量均可制备高质量文库。
3. 双链DNA随机片段化,序列偏好性低。
4. 优化的高保真酶体系,文库产量和质量显著提高。
Package 2-1 组分如下(4℃ 保存):
组分 | AG12562 | AG12561 |
ConA Beads Pro | 20 μl | 60 μl |
DNA Clean Beads | 470 μl | 1.5 ml |
10% SDS | 8 μl | 24 μl |
Package 2-2 组分如下(-20℃ 保存):
组分 | AG12562 | AG12561 |
Lysis Buffer | 400 μl | 1.2 ml |
10X ConA Binding Buffer | 100 μl | 300 μl |
10X Wash Buffer | 700 μl | 1 ml X 2 pcs |
5% Digitonin Solution | 8 μl | 24 μl |
10X Dig-300 Buffer | 220 μl | 660 μl |
BE Buffer | 14 μl | 42 μl |
pAG-Mnase | 4 μl | 12 μl |
CaCl2 Solution | 8 μl | 24 μl |
Stop Buffer | 6 μl | 18 μl |
Proteinase K(20 mg / ml) | 4 μl | 12 μl |
Package 2-2 -20℃保存
运输温度:Package 2-1 冰袋运输
Package 2-2 干冰或者-20℃ 冰袋运输