AccuNext CUT & Tag DNA 建库试剂盒(Illumina)

产品货号: AG12563 / AG12555 / AG12556

¥3,200¥24,800

产品描述

本产品是针对 illumina 高通量测序平台开发的基于 CUT & Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)技术原理研究蛋白质与 DNA 互作的试剂盒。相较于传统的 ChIP-seq 技术,本产品无需进行传统的超声打断、接头连接等繁琐步骤,操作更加简单,具有实验周期短、细胞投入量低、抗体投入量少、文库收量高、信噪比高等特点,适用于胚胎发育、干细胞、肿瘤发生等各种表观遗传学领域的研究。
CUT & Tag 是一种新型的研究 DNA -蛋白质互作的方法,使用了与 Protein A/G 融合的 Tn5 转座酶,在 Protein A/G 引导下精准的与抗体结合,使得 Tn5 转座体能够靶向到目的位点进行酶切反应,同时给切下的 DNA 加上二代测序所必须的部分接头序列,再经过 DNA 提取后进行PCR 扩增及纯化即可获得用于测序的文库,经测序即可获得靶标位点的 DNA 信息。
本产品的反应体系经过了精心优化,实验中所有试剂请使用本产品中提供的,不建议改变任何反应组分或用其他的等效产品替换本产品中组分,以免获得不好的实验结果。如需替换,请先进行验证。

 

产品优势

1. 适用于 illumina 测序平台:整合了 illumina 接头,构建的 DNA 文库可直接进行 NGS 测序。
2. 细胞范围兼容性广:可从 100~105 个细胞起始量进行实验。
3. 信噪比高:背景噪声信号低,实验重复性好。
4. 操作简单:全程磁珠提取纯化,操作简单迅速。
5. pA/G-Transposome Mix 性能强:pA/G 结构域对兔、鼠等多种来源的抗体具有广谱的亲和性,靶向精准;优化的 Tn5 酶能够高效、准确切割靶 DNA。
6. 测序质量高:优化的 PCR 扩增体系,测序数据质量高。

 

产品组成

Package 3-1 组分如下(-80℃ 保存):

组分 AG12563 AG12555 AG12556
pA/G-Transposome Mix 4 μl 12 μl 48 μl

Package 3-2 组分如下(4℃ 保存):

组分 AG12563 AG12555 AG12556
ConA Beads Pro 20 μl 60 μl 240 μl
DNA Clean Beads 660 μl 1 ml x 2 pcs 8 ml
10% SDS 8 μl 24 μl 96 μl

Package 3-3 组分如下(-20℃ 保存):

组分 AG12563 AG12555 AG12556
Lysis Buffer 400 μl 1.2 ml 1.2 ml X 4 pcs
10X ConA Binding Buffer 100 μl 300 μl 1.2 ml
10X Wash Buffer 1 ml 1.6 ml x 2 pcs 1.6 ml X 6 pcs
5% Digitonin Solution 28 μl 80 μl 320 μl
10X Dig-300 Buffer 220 μl 660 μl 1.2 ml X 2 pcs
BE Buffer 14 μl 42 μl 168 μl
MgCl2 Solution 8 μl 24 μl 96 μl
Stop Buffer 6 μl 18 μl 72 μl
AccuNext PCR Mix Ⅱ 80 μl 240 μl 960 μl
Proteinase K(20 mg/ml) 4 μl 12 μl 48 μl

注意:AccuNext 转座体建库适配接头引物(Illumina)(Code No. AG12532 / AG12533 / AG12534)为实验必须试剂,但本产品中未配制,需要单独购买。AccuNext 转座体建库适配接头引物(Illumina)的信息见附录1。

 

保存与运输
保存温度:Package 3-1 -80℃ 保存
Package 3-2 4℃ 保存(避免冻结)
Package 3-3 -20℃ 保存
运输温度:Package 3-1 干冰运输
Package 3-2 冰袋运输
Package 3-3 干冰或者-20℃ 冰袋运输
实验示例

1、使用本产品对 K562 Cells 进行文库构建,细胞数量为 105(循环数13)。对文库进行 Agilent 2100 Bioanalyzer 检测。结果如下图所示:


图1:Agilent 2100 Bioanalyzer文库长度检测

2、使用本产品对不同细胞量(1×105、1×104、1×103 Cells)的 K562 Cells 进行文库构建,使用 H3K4me3 抗体,不同细胞量均可获得较好的测序数据,TSS 富集以及 IGV 视图信噪比高 (2号染色体上部分具有代表性区域),对目的基因位点有明显富集,如下图所示:


图2:TSS富集图


图3:chr2 IGV部分视图