产品描述
本产品是针对 illumina 高通量测序平台设计的链特异性 RNA 测序文库构建试剂 盒，可从 1~100 个细胞或 10 pg ~ 10 ng 的 RNA 样本进行 RNA 文库构建，包含 DNA 消化、RNA 片段化、逆转录 ( RT ) 、PCR 文库扩增所需的所有组分。本产品中 gDNA Clean Enzyme 可有效去除样本中残留的基因组 DNA，可根据样本中是否含基 因组 DNA 残留选择是否添加 gDNA Clean Enzyme，本产品通过加热使 RNA 片段 化，然后用带通用接头序列的 3′-N6 Primer 进行反转录，反转后在 cDNA 末端加上特 定接头；搭配带有 illumina 测序接头的引物进行 PCR 扩增【例如，AccuNext CDI 接 头引物（Illumina，适用于 RNA 文库）（Code No. AG12505、AG12506、 AG12507）】，随后根据需要进行核糖体 RNA 去除，再使用通用引物进行二轮扩 增，纯化完成即可获得适用于 illumina 测序平台的测序文库。 本产品操作简单，反转与接头连接一步完成，适用于低投入量和低质量的 RNA 进 行建库，同时本产品保留了 RNA 链的方向性，可获得 RNA 链特异性的测序数据。 本产品的反应体系经过了精心优化，请使用本产品中提供的试剂进行 RNA 片段化、 逆转录和 PCR 文库扩增实验，不建议改变任何反应组分的用量及浓度或用其他的等效 产品替换本产品中组分，以免获得不好的结果。如需替换，请先进行验证。 本产品中不包含 rRNA 去除模块，可根据需要选择合适的 rRNA 去除试剂。
产品优势
1. 适用于 illumina 测序平台：整合了 Index 和 illumina 接头，构建的 RNA 文库可直 接进行 NGS 测序。
2. 灵敏度高：可从单细胞或 10 pg Total RNA 进行 RNA 文库构建。
3. 用途广泛：适用于 RIN 值 2 ~ 10 的 RNA 样本，同时兼容降解样本（如 FFPE 样 本）及有基因组 DNA 残留样本。
4. 操作简单：无需进行传统的末端修复、接头连接等繁琐的步骤，即可获得 RNA 测 序文库。
5. 能准确识别 RNA 链特异性：Read 1 读取的是原始 RNA 的反义链序列，Read 2 读取的是原始 RNA 的正义链序列。
产品组成
Package 2-1 组分如下（-80℃ 保存）：
| 组分 | AG12595 | AG12596 |
| 5 ‘- Adapter Primer Mix II | 54 μl | 216 μl |
| Control Total RNA（1 μg /μl）*1 | 5 μl | 5 μl |
*1：Control Total RNA 为 293T Cell Total RNA。
Package 2-2 组分如下（-20℃ 保存）：
| 组分 | AG12595 | AG12596 |
| RNase Inhibitor ( 40 U/μl ) | 18 μl | 72 μl |
| 5X First-Strand Buffer II | 48 μl | 192 μl |
| gDNA Clean Enzyme | 12 μl | 48 μl |
| 3′-N6 Primer | 12 μl | 48 μl |
| AccuNext RTL Enzyme Mix II | 24 μl | 96 μl |
| AccuNext DNA Polymerase (1 U/μl ) | 36 μl | 144 μl |
| 2X AccuNext PCR Buffer | 900 μl | 900 μl X 4 pcs |
| AccuNext PCR Primer Mix | 24 μl | 96 μl |
| Nuclease free water | 1 ml | 1 ml X 3 pcs |
注意：AccuNext CDI 接头引物（Illumina，适用于 RNA 文库） （Code No. AG12505、 AG12506、AG12507）为实验必须试剂，但本产品中未配置，需要单独购买。AccuNext CDI 接头引物（Illumina，适用于 RNA 文库）的信息见附录 A 和 B。
保存与运输
保存温度：
Package 2-1 -80℃ 保存
Package 2-2 -20℃ 保存
运输温度：
运输温度：
Package 2-1 干冰运输（避免反复冻融。）
Package 2-2 干冰运输或-20℃冰袋运输
