Evo M-MLV 一步法RT-qPCR 探针法试剂盒(含 UNG)

产品货号: AG11754

¥1,800

产品描述

本产品是基于探针法进行一步法 RT-qPCR 专用试剂盒,反转录和 qPCR 反应在同一管内完成,操作简单、快捷。
本产品使用了延伸能力较强的 Evo M-MLV 反转录酶,整合热启动 Accurate Taq HS 的优越性能,可以在短时间内高效合成 cDNA 并进行高效稳定的 qPCR 扩增。本产品适用性广,对于不同复杂度的基因均可以进行很好的扩增,同时该产品可兼顾单重或多重检测。适用于病毒 RNA 等微量 RNA 的检测。
本产品中还引入了 dUTP/UNG 防污染系统,在 PCR 反应过程中以 dUTP 取代 dTTP,利用 UNG 酶能选择性水解含 dU 的 DNA 链,而对不含 dU 的 DNA 链没有任何影响的特性,除去 PCR 反应体系配制过程中引入的含 dU 的污染模板,从而可有效防止 PCR 假阳性结果的产生;同时,本产品中还添加了在常温状态下能够抑制 DNA Polymerase 活性的单克隆抗体,能够有效抑制非特异性扩增,提高反应灵敏度,提升结果准确性。

产品优势

1. 本产品是一步法 RT-qPCR 反应试剂盒,可在单管内完成反转录与 qPCR 反应,简化操作,提高效率,可有效地降低因多次操作而造成污染的可能性。
2. 本产品采用了反应性能优越的反转录酶和热启动聚合酶,搭配精心优化的反应体系,具有特异性强、扩增效率高等特点。
3. 本产品中引入了 dUTP/UNG 防污染系统,可除去含 dU 的 PCR 产物污染,从而有效防止出现 PCR 假阳性结果,提升实验结果的准确性。

产品组成
组分 规格
2X One Step RT-qPCR Buffer IV (Probe) 1.25 ml X 2 pcs
One Step Enzyme Mix IV* 400 μl
RNase free water 1 ml X 3 pcs

*1:含有 Evo M-MLV RTase Enzyme、Accurate Taq HS DNA Polymerase、UNG Enzyme 与 RNase Inhibitor 等。

保存与运输
保存温度:-20℃保存
运输温度:干冰运输或-20℃冰袋运输。
示例一

以 293T 细胞 Total RNA (100 ng-10 pg)为模版,用 RNase free water 代替模板作为阴性对照,进行三重检测,分别为 TFR 基因(GC 含量为 38%,FAM 通道)、Actin 基因(GC含量为 59%,HEX 通道),RPP30 基因(GC 含量为 62%,CY5 通道)。所用定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。实验结果如下:

结果如上图所示:
1、不同浓度的模板在 45 cycles 以内均能获得良好的扩增。
2、阴性对照在 45 cycles 没有检出。
3、扩增效率为 102.9%,R2=0.9994。

结果如上图所示:
1、不同浓度的模板在 45 cycles 以内均能获得良好的扩增。
2、阴性对照在 45 cycles 没有检出。
3、扩增效率为 102.1%,R2=0.9996。

结果如上图所示:
1、不同浓度的模板在 45 cycles 以内均能获得良好的扩增。
2、阴性对照在 45 cycles 没有检出。
3、扩增效率为 105.2%,R2=0.9996。