Evo M-MLV 反转录试剂预混液(用于 qPCR )

产品货号:AG11706

¥1,400

产品描述

本制品是 Real Time RT-PCR 专用的反转录试剂预混液。使用了延伸能力较强的 Evo M-MLV 反转录酶,只需要 15 min 即可有效合成 cDNA,合成得到的 cDNA 可用于嵌合法和探针法 qPCR 分析。5X Evo M-MLV RT Master Mix 含有反转录反应所需的所有组分,只需加入 RNA 模板与水即可直接进行反应,使用方便,可减少试剂损失及实验误差。本制品针对 Oligo dT (18T) Primer、Random 6 mers Primer 用量进行了优化,使反转录产物兼容嵌合法和探针法 qPCR 分析,能够进行高效的基因表达分析。

产品优势

① 可快速高效合成 cDNA,仅需 15min 就可合成 cDNA,可用于嵌合法和探针法 qPCR 分析。
② 本制品为预混 Premix,只需加入 RNA 模板与水即可直接进行反应。
③ 本制品针对 Oligo dT (18T) Primer、Random 6 mers Primer 用量进行了优化,使反转录产物兼容嵌合法和探针法 qPCR 分析。

产品组成
组分 规格
5X Evo M-MLV RT Master Mix *1 400 μl
RNase free water 1 ml x 2 pc

*1:含有Evo M-MLV RTase、RNase Inhibitor、dNTP、Oligo dT (18T) Primer、Random 6 mers Primer、反应 Buffer。

保存与运输
保存温度:-20℃
运输温度:干冰或者 -20℃ 冰袋
示例一

使用本制品对小鼠 Total RNA 进行反转录,再以此 cDNA 为模板,取 2 μl 的 cDNA 原液,通过嵌合法 qPCR 检测小鼠 GAPDH 基因 (本实验例 qPCR 使用 SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR Kit, Code. AG11701 进行)。RNA 起始量 1 μg~1 pg。

结果如上图所示:
① 扩增效率为 108.3%,R2=0.992。
② 本制品的反转效率高,能在宽广的模板范围内进行准确的定量,1 μg ~ 1 pg Total RNA 反转录获得的 cDNA 扩增曲线呈现良好的线性关系。
③ 熔解曲线峰型单一,扩增特异性好。

示例二

使用本制品对 293T 细胞的 Total RNA 进行反转录,RNA起始量 1 μg~10 pg。 再以此 cDNA 为模板,取 2 μl 的 cDNA 原液,通过嵌合法 qPCR 检测 Human H32F 基因 (TFRC) (本实验例 qPCR 使用 SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR Kit, Code. AG11701 进行)。

结果如上图所示:
① 扩增效率为 97.8%,R2=0.997。
② 本制品的反转效率高,能在宽广的模板范围内进行准确的定量,1 μg ~ 10 pg Total RNA 反转录获得的 cDNA 扩增曲线呈现良好的线性关系。
③ 熔解曲线峰型单一,扩增特异性好。

示例三

使用本制品对 293T 细胞的 Total RNA 进行反转录,RNA 起始量 1 μg ~1 pg。 再以此 cDNA 为模板,取 2 μl 的 cDNA 原液,利用探针法 qPCR 检测 Humanβ-actin 基因(qPCR 使用 Pro Taq HS Premix Probe qPCR Kit, Code No. AG11704 进行)。

结果如上图所示:
① 扩增效率为 93.1%,R2=0.999。
② 本制品的反转效率高,能在宽广的模板范围内进行准确的定量,1 μg ~ 1 pg Total RNA 反转录获得的 cDNA 扩增曲线呈现良好的线性关系。