MethyTect Taq HS PCR试剂盒 (用于重亚硫酸盐处理后的基因组 DNA)

本制品是专门针对重亚硫酸盐修饰后含有尿嘧啶的基因组 DNA 进行 PCR 扩增的产品。经过重亚硫酸盐处理后的基因组 DNA，未甲基化的胞嘧啶 (C) 转化成尿嘧啶 (U)，而甲基化的胞嘧啶（5-mC 或 5-hmC）不会发生转化，进而可以通过 PCR 扩增或测序判断出 DNA 甲基化的情况。重亚硫酸盐修饰后的 DNA 有时会影响 PCR 反应性能，本制品对 DNA Polymerase、反应 buffer 进行优化使其适合于重亚硫酸盐修饰后的基因组 DNA 的扩增。对于比较难扩增的目的片段，可通过调整 Mg²⁺ 或 dNTP 的浓度来调节扩增效率和反应特异性。

本制品中添加了在常温状态下能够抑制 DNA polymerase 活性的单克隆抗体，可以进行 Hot Start PCR，有效的抑制引物二聚体的形成及非特异性扩增。抗体在 PCR 反应最初的 DNA 变性步骤已变性，在常规的 PCR 反应条件下即可使用。

① 重亚硫酸盐修饰后的 DNA 有时会影响PCR反应性能，本制品对 DNA Polymerase、反应 buffer 进行优化使其适合于重亚硫酸盐修饰后的基因组 DNA 的扩增。
② 本制品含有所有必要的用于 PCR 反应的试剂，每个组分单独包装，便于调整 MgCl₂ 及 dNTPs 的反应浓度，获得最佳的实验结果。
③ 本品中添加了能够抑制 Taq 酶活性的单克隆抗体，可以进行热启动反应。在进行 PCR 反应前，抗体与酶结合抑制 Taq 酶的活性，有效抑制引物二聚体的形成及非特异性扩增。