本产品可从 OD600 ≤ 600(例如:菌液 OD 值为 2.0 时,菌液体积为 300 ml)的培养菌液中提取各种无内毒素质粒(Plasmid、 Cosmid 等)。采用了优化的碱裂解法,结合阴离子交换树脂和独特的内毒素清除系统,可有效去除内毒素、蛋白等杂质, 然后通过异丙醇沉淀法脱盐浓缩,最后溶解于 Endo-free TE Buffer 或 Endo-free water 中,即可获得高产量高纯度的质粒 DNA。纯化获得的质粒 DNA内毒素含量 < 0.1 EU/μg,可直接用于转染、体外转录翻译、酶修饰等分子生物学实验。 在相同质量的菌体中,质粒拷贝数不同(高拷贝或低拷贝),纯化获得的质粒 DNA 收量存在差异。 一般情况下,若提取高拷贝质粒 (如:pUC19 等),建议使用 100 ~ 200 ml 过夜培养的菌液,可以纯化得到 200 ~ 500 μg 高纯度质粒 DNA;若提取低拷贝质粒 (如:pBR322 等),建议使用 200 ~ 300 ml 过夜培养的菌液,可以纯化得到 100 ~ 150 μg 高纯度质粒DNA。
组分 | 规格 |
RNase A(10 mg / ml)*2 | 1.2 ml |
Buffer PEL | 100 ml |
Buffer PRS*2 | 120 ml |
Buffer PLS | 100 ml |
Buffer PBS | 100 ml |
Buffer ER | 30 ml |
Buffer PWB | 250 ml |
Endo-free Elution Buffer | 100 ml |
Endo-free water for 70% ethanol*3 | 18 ml |
Endo-free TE Buffer | 10 ml |
Column Filter | 10 pcs |
Plasmid DNA Midi Columns | 10 pcs |
RNase Free Tubes | 10 pcs |
* 1:RNase A(10 mg / ml)包装于 Package 2-1 中,需放置于 -20℃ 保存;其余组分均包装于 Package 2-2 中,室温(15 ~ 30℃)保存。
* 2:Buffer PRS 首次使用前,需要将 RNase A 加入 Buffer PRS 中(RNase A 与 Buffer PRS 体积比为 1:100 ),混合均匀后在瓶子上做好标记。加入了 RNase A 后的 Buffer PRS 需保存在 2 ~ 8℃,可保存 6 个月。
*3:Endo-free water for 70% ethanol 首次使用前,需要吸取 42 ml 自备的无水乙醇加入其中,配制成 70% ethanol 备用。
保存温度:
Package 2-1 -20℃ 保存
Package 2-2 室温(15 ~ 30℃)保存
运输温度:
Package 2-1 干冰运输或 -20℃ 冰袋运输
Package 2-2 室温(15 ~ 30℃)运输