本制品可从 50~100 mg 各种植物(简单植物和富含多糖多酚、富含淀粉、富含油脂等复杂植物)的组织材料(根、茎、叶、花、果实、种子)及真菌等样本中提取获得总 RNA。试剂盒采用独特的裂解系统,无需有毒的酚氯仿抽提,能在迅速裂解组织的同时抑制细胞释放出的核酸酶,保持 RNA 的完整性,同时创造适宜的条件利于 RNA 吸附到硅胶膜上。利用 DNase I 去除残留的基因组 DNA,再通过两种不同的缓冲液洗涤去除盐、蛋白质和大分子等杂质,最后用 RNase Free Water 洗脱,得到高纯度、高收量的 RNA。
本制品包含两种不同的裂解体系:简单植物裂解体系和复杂植物裂解体系。简单植物裂解体系提供的裂解液 Buffer RLS 主要成分为异硫氰酸胍,适用于大多数植物组织的裂解。由于某些植物次级代谢产物较特殊,异硫氰酸胍易使样品产生沉淀,导致 RNA 提取效果不佳,此时可以尝试使用复杂植物裂解体系,复杂植物裂解体系是在裂解液 Buffer PPS 和 Buffer PA-2 的作用下去除多糖多酚、淀粉、油脂等复杂成分,再通过 Buffer RLS 裂解植物组织。使用本产品获得的 RNA 纯度高,蛋白质、基因组 DNA 和其他杂质的污染少,可以直接用于 RT-PCR、Real Time RT-PCR、构建 cDNA 文库、Northern 杂交、斑点杂交、Poly A筛选、体外翻译、RNA 分解酶的保护分析、分子克隆、芯片分析等各种分子生物学实验。
组分 | 规格 |
50X DTT Solution*1 | 700 μl |
DNase I(RNase free)*1 | 200 μl |
10X DNase I Buffer*1 | 1 ml |
Buffer PPS | 25 ml |
Buffer PA-2 | 1.5 ml X 2 |
Buffer RLS | 15 ml x 2 |
Buffer RWA | 30 ml |
Buffer RWB*2 | 30 ml |
RNase Free Water*3 | 13 ml |
Plant RNA Mini Columns*4 | 50 sets |
Collection tubes | 50 pcs |
RNase Free Tubes*4 | 50 pcs |
* 1 此三种组分包装于 Package 2-1 中,需放置于 -20℃ 保存;其余组分均包装于 Package 2-2 中,室温(15 – 25℃)保存。
* 2 Buffer RWB 在首次使用前,请添加 70ml 的 100% 乙醇(Buffer RWB 与无水乙醇体积比为 3∶7),混合均匀后在瓶子上做好标记,室温保存。
* 3 开启后建议保存于 -20℃。
* 4 此组分仅用于洗脱 RNA,前期裂解所用离心管需自备。
保存温度:
Package 2-1 -20℃ 保存;
Package 2-2 室温(15-25℃)保存。
运输温度:
Package 2-1 干冰或 -20℃ 冰袋运输;
Package 2-2 室温运输。