示例一
采用本试剂盒直接扩增不同物种的血液(含 EDTA 抗凝血剂),都能获得很好的扩增效果。

电泳结果如下图所示:

示例二
采用本试剂盒直接扩增不同抗凝血剂保存的人血,都能获得很好的扩增效果。

电泳结果如下图所示:

示例三
采用本试剂盒直接扩增不同植物样本,都能获得很好的扩增效果。

电泳结果如下图所示:

示例四
将水稻叶片、菠菜叶片、鼠尾等材料用蛋白酶 K 法简单裂解 【使用本公司产品 Lysis Buffer for PCR(Code No. AG12306)】,酵母用碱裂解法简单裂解;并以裂解产物为模板,采用本试剂盒扩增不同的 DNA 片段,都能获得很好的扩增效果。

*:水稻叶片延伸速度为 20 sec ~ 24 sec / kb;
*:菠菜叶片延伸速度为 18 sec ~ 24 sec / kb;
*:鼠尾组织延伸速度为 20 sec ~ 36 sec / kb;
*:酵母菌液延伸速度为 20 sec ~ 40 sec / kb。
电泳结果如下图所示:

实验例表
模板类型 |
扩增速度 |
片段大小(kb) |
序列GC含量 |
简单裂解 |
直接扩增 |
裂解后的模板量*2 |
能否扩增*1 |
直接模板量*1 |
能否扩增*1 |
人血 |
30 sec / kb |
1 kb |
36.1% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
人血 |
30 sec / kb |
2 kb |
38.1% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
人血 |
30 sec / kb |
3 kb |
38.7% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
人血 |
30 sec / kb |
4 kb |
36.0% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
人血 |
30 sec / kb |
6 kb |
40.0% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
猪血 |
30 sec / kb |
0.6 kb |
47.6% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
猪血 |
30 sec / kb |
0.8 kb |
50.2% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
猪血 |
30 sec / kb |
2 kb |
57.9% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
猪血 |
30 sec / kb |
2.9 kb |
37.7% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鸡血 |
20 sec / kb |
0.5 kb |
41.0% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鸡血 |
20 sec / kb |
1.2 kb |
36.6% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鸡血 |
30 sec / kb |
1.7 kb |
68.6% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鸡血 |
30 sec / kb |
2.4 kb |
49.4% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
羊血 |
20 sec / kb |
1.6 kb |
66.9% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
羊血 |
20 sec / kb |
2.4 kb |
67.1% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
羊血 |
30 sec / kb |
5.6 kb |
67.2% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鼠血 |
30 sec / kb |
1 kb |
52.2% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鼠血 |
30 sec / kb |
2.6 kb |
65.2% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鼠血 |
30 sec / kb |
3.4 kb |
53.4% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鼠血 |
30 sec / kb |
4 kb |
49.8% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鼠血 |
30 sec / kb |
5 kb |
49.8% |
/ |
/ |
2 μl |
√ |
鼠趾 |
30 sec / kb |
1 kb |
52.2% |
2-4μl 裂解液
(1-2 根鼠趾简单裂解) |
√ |
1-2 根鼠趾 |
√*3 |
鼠趾 |
30 sec / kb |
2.6 kb |
65.2% |
2-4μl 裂解液
(1-2 根鼠趾简单裂解) |
√ |
× |
× |
鼠趾 |
30 sec / kb |
3.4 kb |
53.4% |
2-4μl 裂解液
(1-2 根鼠趾简单裂解) |
√ |
1-2 根鼠趾 |
√*3 |
鼠趾 |
30 sec / kb |
4 kb |
49.8% |
2-4μl 裂解液
(1-2 根鼠趾简单裂解) |
√ |
× |
× |
鼠趾 |
30 sec / kb |
5 kb |
49.8% |
2-4μl 裂解液
(1-2 根鼠趾简单裂解) |
√ |
× |
× |
鼠尾 |
30 sec / kb |
1 kb |
52.2% |
2-4μl 裂解液
(2-3mm 鼠尾简单裂解) |
√ |
2-3 mm |
√*3 |
鼠尾 |
30 sec / kb |
2.6 kb |
65.2% |
2-4μl 裂解液
(2-3mm 鼠尾简单裂解) |
√ |
× |
× |
鼠尾 |
30 sec / kb |
3.4 kb |
53.4% |
2-4μl 裂解液
(2-3mm 鼠尾简单裂解) |
√ |
2-3 mm |
√*3 |
鼠尾 |
30 sec / kb |
4 kb |
49.8% |
2-4μl 裂解液
(2-3mm 鼠尾简单裂解) |
√ |
× |
× |
鼠尾 |
30 sec / kb |
5 kb |
49.8% |
2-4μl 裂解液
(2-3mm 鼠尾简单裂解) |
√ |
× |
× |
鼠耳 |
30 sec / kb |
1 kb |
52.2% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 鼠耳简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√*3 |
鼠耳 |
30 sec / kb |
2.6 kb |
65.2% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 鼠耳简单裂解) |
√ |
× |
× |
鼠耳 |
30 sec / kb |
3.4 kb |
53.4% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 鼠耳简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√*3 |
鼠耳 |
30 sec / kb |
4 kb |
49.8% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 鼠耳简单裂解) |
√ |
× |
× |
鼠耳 |
30 sec / kb |
5 kb |
49.8% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 鼠耳简单裂解) |
√ |
× |
× |
水稻叶片 |
20 sec / kb |
1 kb |
45.6% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
水稻叶片 |
20 sec / kb |
3 kb |
41.5% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
水稻叶片 |
30 sec / kb |
5 kb |
40.5% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
土豆块茎 |
30 sec / kb |
1.3 kb |
39.5% |
2-4μl 裂解液
(5-10mm3 块茎简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
土豆块茎 |
30 sec / kb |
2 kb |
39.6% |
2-4μl 裂解液
(5-10mm3 块茎简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
土豆块茎 |
30 sec / kb |
2.9 kb |
38.2% |
2-4μl 裂解液
(5-10mm3 块茎简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
土豆块茎 |
30 sec / kb |
5.8 kb |
35.4% |
2-4μl 裂解液
(5-10mm3 块茎简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
土豆块茎 |
30 sec / kb |
10 kb |
38.0% |
2-4 μl 裂解液
(5-10mm3 块茎简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
菠菜叶片 |
20 sec / kb |
0.7 kb |
38.9% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
菠菜叶片 |
20 sec / kb |
1 kb |
42.3% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
菠菜叶片 |
30 sec / kb |
5 kb |
33.4% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
菠菜叶片 |
30 sec / kb |
10 kb |
35.1% |
2-4 μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
4-10 mm2 |
√ |
西红柿果肉 |
20 sec / kb |
0.5 kb |
28.2% |
2-4μl 裂解液
(2μl 果肉简单裂解) |
√ |
2 μl |
√ |
西红柿果肉 |
20sec /kb |
1.6 kb |
32.2% |
2-4μl 裂解液
(2μl 果肉简单裂解) |
√ |
2 μl |
√ |
西红柿果肉 |
20 sec / kb |
1.9 kb |
36.0% |
2-4μl 裂解液
(2μl果肉简单裂解) |
√ |
2 μl |
√ |
西红柿果肉 |
30 sec / kb |
3 kb |
37.4% |
2-4μl 裂解液
(2μl 果肉简单裂解) |
√ |
2 μl |
√ |
西红柿果肉 |
30 sec / kb |
4.4 kb |
37.6% |
2-4μl 裂解液
(2μl 果肉简单裂解) |
√ |
2 μl |
√ |
西红柿果肉 |
30 sec / kb |
5 kb |
38.2% |
2-4μl 裂解液
(2μl 果肉简单裂解) |
√ |
2 μl |
√ |
西红柿果肉 |
30 sec / kb |
5.8 kb |
37.6% |
2-4μl 裂解液
(2μl 果肉简单裂解) |
√ |
× |
× |
拟南芥叶片 |
30 sec / kb |
2.2 kb |
35.2% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
/ |
/ |
拟南芥叶片 |
30 sec / kb |
3 kb |
41.0% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
/ |
/ |
拟南芥叶片 |
30 sec / kb |
5 kb |
38.0% |
2-4μl 裂解液
(4-10mm2 叶片简单裂解) |
√ |
/ |
/ |
玉米粒 |
30 sec / kb |
1 kb |
52.4% |
2-4μl 裂解液
(5-10mm3 胚组织简单裂解) |
√ |
× |
× |
玉米粒 |
30 sec / kb |
1.8 kb |
0.48 |
2-4μl 裂解液
(5-10mm3 胚组织简单裂解) |
√ |
× |
× |
酵母菌液 |
20 sec / kb |
0.7 kb |
42.5% |
2-4μl 裂解液
(20μl 菌液简单裂解) |
√ |
× |
× |
酵母菌液 |
20 sec / kb |
1 kb |
41.0% |
2-4μl 裂解液
(20μl 菌液简单裂解) |
√ |
× |
× |
酵母菌液 |
20 sec / kb |
1.3 kb |
58.2% |
2-4μl 裂解液
(20μl 菌液简单裂解) |
√ |
× |
× |
酵母菌液 |
30 sec / kb |
1.7 kb |
58.1% |
2-4μl 裂解液
(20μl 菌液简单裂解) |
√ |
× |
× |
酵母菌液 |
30 sec / kb |
3.9 kb |
45.6% |
2-4μl 裂解液
(20μl 菌液简单裂解) |
√ |
× |
× |
大肠杆菌菌落 |
20 sec / kb |
1 kb |
53.8% |
/ |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
20 sec / kb |
2 kb |
51.1% |
/ |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
20 sec / kb |
3.5 kb |
52.2% |
/ |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
20 sec / kb |
5 kb |
53.2% |
/ |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
20 sec / kb |
6.7 kb |
51.8% |
/ |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
20 sec / kb |
11 kb |
50.7% |
/ |
/ |
单菌落 |
√ |
*1:√表示能够扩增,× 表示未扩增出目的条带,/ 表示未进行扩增。
*2:简单裂解使用本公司制品 Lysis Buffer for PCR(Code. AG12306)。
*3:电泳出现挂孔,加 1-3 μl (20 mg / ml)蛋白酶(根据挂孔严重程度调整),瞬时离心放置5 min 后再电泳,可看到目的条带。