2X 预混型探针法 qPCR 试剂盒 III （含 UNG）

2X 预混型探针法 qPCR 试剂盒 III （含 UNG）

产品货号：CM0309

¥400

产品描述

本产品是一种 2X Premix 预混液，只需加入引物、探针、模板和水即可进行反应，操作非常简单。
本产品含有新型突变型 Accurate Super Taq HS DNA 聚合酶，配合精心优化的反应 Buffer，提高了 PCR 扩增性能、低浓度模板检测灵敏度及具有良好的杂质耐受性能，可以进行高灵敏度的 Real Time qPCR 反应，对靶基因进行准确定量检测，适用于 DNA 等微量病毒的检测。
本产品中引入了 dUTP/UNG 防污染系统，在 PCR 反应过程中以 dUTP 取代 dTTP，利用 UNG 酶能选择性水解含 dU 的 DNA 链，而对不含 dU 的 DNA 链没有任何影响的特性，除去 PCR 反应体系配制过程中引入的含 dU 的污染模板，从而可有效防止 PCR 假阳性结果的产生；同时，本产品中还添加了在常温状态下能够抑制 DNA Polymerase 活性的单克隆抗体，能够有效抑制非特异性扩增，提高反应灵敏度，提升结果准确性。

 

产品优势

1. 本产品是一种 2X 预混液，反应液配制十分简单，仅需加入引物、模板、探针及水即可进行 qPCR 反应。
2. 本产品采用了性能优越的新型突变型 Accurate Super Taq HS DNA 聚合酶及优化的反应体系，具有特异性强、扩增效率高及良好的杂质耐受性能。
3. 本产品灵敏度高，可对个位数拷贝模板稳定检出，并可进行单重或者多重检测。
4. 本产品中引入了 dUTP/UNG 防污染系统，可除去含 dU 的 PCR 产物污染，从而有效防止出现 PCR 假阳性结果，提升实验结果的准确性。

产品组成
组分 规格
2X Accurate Taq HS Probe Premix III (UNG Plus) 1 ml

 

保存与运输
保存温度：-20℃保存
运输温度：干冰运输或者-20℃冰袋运输

1、 扩增性能
以非洲猪瘟 B646L 标准物质 [ GBW ( E ) 091034 ]、猪肉 DNA 为模板，用 RNase free water 代替模板作为阴性对照，进行二重检测，分别检测B646L 基因（FAM 通道）、CYTB 基因（HEX 通道）。25 μl 反应体系中非洲猪瘟 B646L 模板加入量为 35 copies、猪肉 RNA 模板加入量为 500  pg。
所用定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。实验结果如下：

结果如上图所示：
1、本产品灵敏度极高，对于低拷贝及微量的模板均能进行很好的检出。
2、阴性对照在 45 cycles 内没有检出。

 

2. 抗抑制能力

将鼠尾、人咽拭子样本用蛋白酶K法简单裂解【使用本公司产品 Lysis Buffer for PCR（Code No. AG12306）】，取 2 μl 简单裂解产物使用本产品与竞品共同进行扩增；同时直接取人血样本、猪血样本、鼠血样本2μl使用本产品与竞品共同进行扩增。
检测所用的定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。实验结果如下：

结果如上图所示：
1、抗抑制能力好，可以进行血液、咽拭子和鼠尾扩增;
2、CM0309 抗抑制能力显著优于竞品 ;

 

3. 支持快速程序

以猪圆环病毒标准物质、猪肉 RNA 为模板，用 RNase free water 代替模板作为阴性对照，进行二重检测，分别检测 ORF 基因（FAM 通道）、CYTB 基因（HEX 通道）。25 μl 反应体系中猪圆环病毒标准物质模板加入量为 0.2 copies，猪肉 RNA 模板加入量为 500 pg。同时配制后分别进行标准程序及快速程序。
所用定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems，实验结果如下：
程序如下：

实验结果如下：
< FAM 通道>

结果如上图所示：
1、本产品灵敏度极高，对于低拷贝及微量的模板均能进行很好的检出。
2、产品支持快速检测，标准模式与快速模式均能很好的检测出。
3、阴性对照在 45 cycles 内没有检出。

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