AccuNext Small RNA 文库制备试剂盒（Illumina）

本产品是针对 illumina 高通量测序平台设计的 Small RNA 测序文库制备试剂盒，可从 1 ng~2μg Total RNA（含有 Small RNA）或 1 ng~1μg 富集的 Small RNA 起始制备Small RNA 测序文库，用于分析多种小 RNA（包括 miRNA、piRNA、snoRNA 和 snRNA等）。利用 Poly (A) Polymerase 在 RNA 3’末端加上 Poly (A) 尾，再用带有特定接头的 Oligo (dT) 引物进行反转录，利用反转录酶的末端转移酶活性，在 cDNA 末端加上特定接头。搭配 illumina 测序接头的引物进行 PCR 扩增【例如，AccuNext CDI 接头引物（Illumina，适用于 RNA 文库）（Code No. AG12505、AG12506、AG12507）】，通过磁珠分选，获得 150 bp ~ 350 bp 适用于 illumina 测序平台的 Small RNA 文库。
本产品操作简单，无需进行接头连接等繁琐的步骤，即可添加 illumina 测序接头和index 序列，获得 Small RNA 文库；优化的反应体系，提高了文库转化效率，能兼容不同的模板量，获得的测序结果稳定。
本产品中包含 RNA 3’末端加 Poly (A) 尾、逆转录（RT）和 PCR 扩增所需的所有组分，反应体系经过了精心优化，实验中所有试剂请使用本产品中组分，不建议改变任何反应组分的用量及浓度或用其他等效产品替换，以免获得不好的结果。如需替换，请先进行验证。

1. 适用于 Illumina 测序平台：整合了 Index 和 Illumina 接头，构建的 Small RNA 文库可直接进行 Illumina 高通量测序平台测序。
2. 模板适用范围广：能够从 1 ng~2 μg Total RNA（含有 Small RNA）或 1 ng~1μg 富集的 Small RNA 中分析多种 Small RNA，包括 miRNA、piRNA、snoRNA 和 snRNA等。

3. 偏好性低、操作简单，无需进行接头连接等繁琐的步骤，即可添加 illumina 接头和index 序列，获得 Small RNA 测序文库，避免通过接头连接带来的偏好性。

Package 2-1组分如下（-80℃保存）：

组分	AG12511 (12 rxns)	AG12512 (48 rxns)
Control micRNA (2.5 ng / μl)	5 μl	5 μl
smRNA Adapter Mix Solution	78 μl	312 μl

Package 2-2 组分如下（-20℃保存）：

组分	AG12511 (12 rxns)	AG12512 (48 rxns)
Poly(A) Polymerase (0.5 U / μl)	12 μl	48 μl
4X Poly(A) Reaction Buffer	30 μl	120 μl
RNase Inhibitor ( 40 U / μl )	9 μl	36 μl
3’smRNA dT Primer	12 μl	48 μl
AccuNext Reverse Transcriptase( 100 U / μl )	24 μl	96 μl
2X AccuNext PCR Buffer	600 μl	1.2 ml X 2 pcs
AccuNext DNA Polymerase ( 1 U / μl )	24 μl	96 μl
Nuclease free water	1 ml X 2 pcs	1 ml X 5 pcs
Tris Buffer（5 mM）	900 μl	1.2 ml X 3 pcs

注意：AccuNext CDI 接头引物（Illumina，适用于 RNA 文库） （Code No. AG12505、AG12506、 AG12507）为实验必须试剂，但本产品中未配置，需要单独购买。AccuNext CDI 接头引物（Illumina，适用于 RNA 文库）的信息见附录 A 和 B。

保存温度：Package 2-1 -80℃保存         Package 2-2 -20℃保存
运输温度：Package 2-1 干冰运输           Package 2-2 -20℃冰袋运输或干冰运输