AdeptTect 快速 HS PCR 预混液(含染料)

产品货号:AG12301

¥300

产品描述

AdeptTect Flash HS PCR Master Mix(dye plus)是适用于快速 PCR 反应的 2 倍浓度预混型制品,具有超快的延伸速度(可达 5 sec / kb );同时,本制品还具有高扩增效率、高灵敏度、高特异性、高退火效率等特点。本制品中含有电泳所必需的色素试剂(蓝色和黄色色素),制品溶液呈现鲜艳的绿色;使用本制品时,只需要在溶液中加入模板、引物和水便可以进行 PCR 反应;PCR 反应后可直接进行电泳,操作便捷,可最大限度地减少人为误差,并在较短时间内即可获得检测结果。此外,本制品中还添加了在常温状态下能够抑制 DNA Polymerase 活性的单克隆抗体,可以进行 Hot Start PCR,有效抑制引物二聚体的形成及非特异性扩增。
本制品扩增得到的产物 3’ 端不含 A 碱基,因此不可用于 TA 克隆。

产品优势

① 本制品具有高扩增效率、高灵敏度、高特异性、高退火效率及延伸速度快等特点,可提高 PCR 扩增效率。
② 本制品具有超快的延伸速度(可达 5 sec / kb )。
③ 本制品为 2X 预混液,加入模板、引物和水即可进行 PCR 反应,操作简便,可最大限度地减少人为误差。
④ 本制品含有电泳所必需的色素试剂(蓝色和黄色色素),PCR 反应后可以直接进行电泳,在较短时间内即可获得检测结果。

产品组成
组分 规格
2X Flash HS PCR Master Mix(dye plus) 500 μl x 6 pc
保存与运输
保存温度:-20℃
运输温度:干冰或者 -20℃ 冰袋
示例一

以 Human gDNA 为模板,采用本试剂盒以不同的延伸速度扩增不同长度的 DNA 片段,能以 10 sec 的延伸时间扩增出 4 kb DNA 片段。

电泳结果如下图所示:

示例二

以 Human Total RNA 反转录获得的 cDNA 为模板,扩增不同长度的 DNA 片段。

电泳结果如下图所示:

示例三

挑取 E.coli 单菌落加入至 20 μl RNase free water 中,混匀后取 1 μl 菌液为模板,扩增不同长度的 DNA 片段,能以 3 sec / kb 扩增出 7 kb DNA 片段。

电泳结果如下图所示:

 

示例四

以 Human gDNA 为模板,添加不同模板量(500 ng、300 ng、100 ng、10 ng、1 ng、100 pg),采用本试剂盒扩增 4 kb DNA 片段,模板量低至 1 ng 时,能以 5 sec / kb 的延伸速度扩增出目的片段。

电泳结果如下图所示:

 

示例五

以 λDNA 为模板,添加不同模板量(5 ng、1 ng、100 pg、10 pg、1 pg、100 fg),采用本试剂盒扩增 4 kb DNA 片段,模板量低至 100 fg 时,能以 5 sec / kb 的延伸速度扩增出目的片段。

电泳结果如下图所示:

 

示例六

以 Human gDNA(泳道 1~2)为模板,可扩增 17.5 kb 的 DNA 片段;以 λDNA(泳道 3~6)为模板,能够很好地扩增 40 kb 的 DNA 片段。

电泳结果如下图所示:

实验例表
模板类型 扩增速度 片段大小(kb) 序列GC含量 模板提取方式 模板量 能否扩增
Human gDNA 30 sec /kb 0.5 kb 75.4% 试剂法 100 ng
Human gDNA 5 sec /kb 1 kb 36.1% 试剂法 100 ng
Human gDNA 5 sec /kb 2 kb 38.1% 试剂法 100 ng
Human gDNA 1 min/kb 2.1 kb 26.9% 试剂法 100 ng
Human gDNA 4 sec /kb 3 kb 38.7% 试剂法 100 ng
Human gDNA 2.5 sec /kb 4 kb 36.0% 试剂法 100 ng
Human gDNA 10 sec /kb 6 kb 40.0% 试剂法 100 ng
Human gDNA 15 sec /kb 7.5 kb 37.1% 试剂法 100 ng
Human gDNA 15 sec /kb 10 kb 37.7% 试剂法 100 ng
Human gDNA 15 sec /kb 12 kb 40.0% 试剂法 100 ng
Human gDNA 15 sec /kb 17.5 kb 37.4% 试剂法 100 ng
Mouse  gDNA 5 sec /kb 1 kb 52.2% 磁珠法 100 ng
Mouse  gDNA 5 sec /kb 2.6 kb 65.2% 磁珠法 100 ng
Mouse  gDNA 5 sec /kb 3.4 kb 53.4% 磁珠法 100 ng
Mouse  gDNA 5 sec /kb 4 kb 49.8% 磁珠法 100 ng
Mouse  gDNA 15 sec /kb 5 kb 49.8% 磁珠法 100 ng
Mouse  gDNA 15 sec /kb 11 kb 51.6% 磁珠法 100 ng
Chicken  gDNA 5 sec /kb 0.5 kb 41.0% 磁珠法 74 ng
Chicken  gDNA 5 sec /kb 1.2 kb 36.6% 磁珠法 74 ng
Chicken  gDNA 5 sec /kb 1.7 kb 68.6% 磁珠法 74 ng
Chicken  gDNA 5 sec /kb 2.4 kb 49.4% 磁珠法 74 ng
Pig gDNA 5 sec /kb 0.6 kb 47.6% 磁珠法 30 ng
Pig gDNA 5 sec /kb 0.8 kb 50.2% 磁珠法 30 ng
Pig gDNA 5 sec /kb 2 kb 57.9% 磁珠法 30 ng
Pig gDNA 5 sec /kb 2.9 kb 37.7% 磁珠法 30 ng
Pig gDNA 10 sec /kb 6 kb 59.3% 磁珠法 30 ng
Potato gDNA 5 sec /kb 1.3 kb 39.5% 柱式法 50 ng
Potato gDNA 5 sec /kb 2 kb 39.6% 柱式法 50 ng
Potato gDNA 5 sec /kb 2.9 kb 38.2% 柱式法 50 ng
Potato gDNA 10 sec /kb 5.8 kb 35.4% 柱式法 50 ng
Potato gDNA 10 sec /kb 10 kb 38.0% 柱式法 50 ng
Tomato gDNA 5 sec /kb 0.5 kb 28.2% 磁珠法/柱式法 120 ng
Tomato gDNA 5 sec /kb 1.6 kb 32.2% 磁珠法/柱式法 120 ng
Tomato gDNA 5 sec /kb 1.9 kb 36.0% 磁珠法/柱式法 120 ng
Tomato gDNA 5 sec /kb 3 kb 37.4% 磁珠法/柱式法 120 ng
Tomato gDNA 5 sec /kb 4.4 kb 37.6% 磁珠法/柱式法 120 ng
Tomato gDNA 5 sec /kb 5 kb 38.2% 磁珠法/柱式法 120 ng
Rice gDNA 5 sec /kb 1 kb 45.6% 磁珠法/柱式法 100 ng/200 ng
Rice gDNA 5 sec /kb 3 kb 41.5% 磁珠法/柱式法 100 ng/200 ng
Rice gDNA 5 sec /kb 5 kb 40.5% 磁珠法/柱式法 100 ng/200 ng
Rice gDNA 10 sec /kb 7.5 kb 46.8% 磁珠法/柱式法 100 ng/200 ng
Rice gDNA 10 sec /kb 12 kb 44.6% 磁珠法/柱式法 100 ng/200 ng
λDNA 20 sec /kb 30 kb 51.1% 2 ng
大肠杆菌菌落 5 sec /kb 1 kb 53.8% / 单菌落
大肠杆菌菌落 5 sec /kb 2 kb 51.1% / 单菌落
大肠杆菌菌落 5 sec /kb 3.5 kb 52.2% / 单菌落
大肠杆菌菌落 5 sec /kb 5 kb 53.2% / 单菌落
大肠杆菌菌落 10 sec /kb 6.7 kb 51.8% / 单菌落
大肠杆菌菌落 10 sec /kb 11 kb 50.7% / 单菌落

注:√表示能够扩增,/表示未提取。-表示直接购买。