示例一
以 Human gDNA 为模板,采用本试剂盒以不同的延伸速度扩增不同长度的 DNA 片段,能以 10 sec 的延伸时间扩增出 4 kb DNA 片段。
电泳结果如下图所示:
示例二
以 Human Total RNA 反转录获得的 cDNA 为模板,扩增不同长度的 DNA 片段。
电泳结果如下图所示:
示例三
挑取 E.coli 单菌落加入至 20 μl RNase free water 中,混匀后取 1 μl 菌液为模板,扩增不同长度的 DNA 片段,能以 3 sec / kb 扩增出 7 kb DNA 片段。
电泳结果如下图所示:
示例四
以 Human gDNA 为模板,添加不同模板量(500 ng、300 ng、100 ng、10 ng、1 ng、100 pg),采用本试剂盒扩增 4 kb DNA 片段,模板量低至 1 ng 时,能以 5 sec / kb 的延伸速度扩增出目的片段。
电泳结果如下图所示:
示例五
以 λDNA 为模板,添加不同模板量(5 ng、1 ng、100 pg、10 pg、1 pg、100 fg),采用本试剂盒扩增 4 kb DNA 片段,模板量低至 100 fg 时,能以 5 sec / kb 的延伸速度扩增出目的片段。
电泳结果如下图所示:
示例六
以 Human gDNA(泳道 1~2)为模板,可扩增 17.5 kb 的 DNA 片段;以 λDNA(泳道 3~6)为模板,能够很好地扩增 40 kb 的 DNA 片段。
电泳结果如下图所示:
实验例表
模板类型 |
扩增速度 |
片段大小(kb) |
序列GC含量 |
模板提取方式 |
模板量 |
能否扩增 |
Human gDNA |
30 sec /kb |
0.5 kb |
75.4% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
5 sec /kb |
1 kb |
36.1% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
5 sec /kb |
2 kb |
38.1% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
1 min/kb |
2.1 kb |
26.9% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
4 sec /kb |
3 kb |
38.7% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
2.5 sec /kb |
4 kb |
36.0% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
10 sec /kb |
6 kb |
40.0% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
15 sec /kb |
7.5 kb |
37.1% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
15 sec /kb |
10 kb |
37.7% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
15 sec /kb |
12 kb |
40.0% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Human gDNA |
15 sec /kb |
17.5 kb |
37.4% |
试剂法 |
100 ng |
√ |
Mouse gDNA |
5 sec /kb |
1 kb |
52.2% |
磁珠法 |
100 ng |
√ |
Mouse gDNA |
5 sec /kb |
2.6 kb |
65.2% |
磁珠法 |
100 ng |
√ |
Mouse gDNA |
5 sec /kb |
3.4 kb |
53.4% |
磁珠法 |
100 ng |
√ |
Mouse gDNA |
5 sec /kb |
4 kb |
49.8% |
磁珠法 |
100 ng |
√ |
Mouse gDNA |
15 sec /kb |
5 kb |
49.8% |
磁珠法 |
100 ng |
√ |
Mouse gDNA |
15 sec /kb |
11 kb |
51.6% |
磁珠法 |
100 ng |
√ |
Chicken gDNA |
5 sec /kb |
0.5 kb |
41.0% |
磁珠法 |
74 ng |
√ |
Chicken gDNA |
5 sec /kb |
1.2 kb |
36.6% |
磁珠法 |
74 ng |
√ |
Chicken gDNA |
5 sec /kb |
1.7 kb |
68.6% |
磁珠法 |
74 ng |
√ |
Chicken gDNA |
5 sec /kb |
2.4 kb |
49.4% |
磁珠法 |
74 ng |
√ |
Pig gDNA |
5 sec /kb |
0.6 kb |
47.6% |
磁珠法 |
30 ng |
√ |
Pig gDNA |
5 sec /kb |
0.8 kb |
50.2% |
磁珠法 |
30 ng |
√ |
Pig gDNA |
5 sec /kb |
2 kb |
57.9% |
磁珠法 |
30 ng |
√ |
Pig gDNA |
5 sec /kb |
2.9 kb |
37.7% |
磁珠法 |
30 ng |
√ |
Pig gDNA |
10 sec /kb |
6 kb |
59.3% |
磁珠法 |
30 ng |
√ |
Potato gDNA |
5 sec /kb |
1.3 kb |
39.5% |
柱式法 |
50 ng |
√ |
Potato gDNA |
5 sec /kb |
2 kb |
39.6% |
柱式法 |
50 ng |
√ |
Potato gDNA |
5 sec /kb |
2.9 kb |
38.2% |
柱式法 |
50 ng |
√ |
Potato gDNA |
10 sec /kb |
5.8 kb |
35.4% |
柱式法 |
50 ng |
√ |
Potato gDNA |
10 sec /kb |
10 kb |
38.0% |
柱式法 |
50 ng |
√ |
Tomato gDNA |
5 sec /kb |
0.5 kb |
28.2% |
磁珠法/柱式法 |
120 ng |
√ |
Tomato gDNA |
5 sec /kb |
1.6 kb |
32.2% |
磁珠法/柱式法 |
120 ng |
√ |
Tomato gDNA |
5 sec /kb |
1.9 kb |
36.0% |
磁珠法/柱式法 |
120 ng |
√ |
Tomato gDNA |
5 sec /kb |
3 kb |
37.4% |
磁珠法/柱式法 |
120 ng |
√ |
Tomato gDNA |
5 sec /kb |
4.4 kb |
37.6% |
磁珠法/柱式法 |
120 ng |
√ |
Tomato gDNA |
5 sec /kb |
5 kb |
38.2% |
磁珠法/柱式法 |
120 ng |
√ |
Rice gDNA |
5 sec /kb |
1 kb |
45.6% |
磁珠法/柱式法 |
100 ng/200 ng |
√ |
Rice gDNA |
5 sec /kb |
3 kb |
41.5% |
磁珠法/柱式法 |
100 ng/200 ng |
√ |
Rice gDNA |
5 sec /kb |
5 kb |
40.5% |
磁珠法/柱式法 |
100 ng/200 ng |
√ |
Rice gDNA |
10 sec /kb |
7.5 kb |
46.8% |
磁珠法/柱式法 |
100 ng/200 ng |
√ |
Rice gDNA |
10 sec /kb |
12 kb |
44.6% |
磁珠法/柱式法 |
100 ng/200 ng |
√ |
λDNA |
20 sec /kb |
30 kb |
51.1% |
– |
2 ng |
√ |
大肠杆菌菌落 |
5 sec /kb |
1 kb |
53.8% |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
5 sec /kb |
2 kb |
51.1% |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
5 sec /kb |
3.5 kb |
52.2% |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
5 sec /kb |
5 kb |
53.2% |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
10 sec /kb |
6.7 kb |
51.8% |
/ |
单菌落 |
√ |
大肠杆菌菌落 |
10 sec /kb |
11 kb |
50.7% |
/ |
单菌落 |
√ |
注:√表示能够扩增,/表示未提取。-表示直接购买。