本产品是通用型直接 PCR 反应的2 倍浓度预混型试剂,具有较强的扩增性能及广泛的模板适用性,对复杂模板如高 GC 含量、高 AT 含量的模板都能进行有效的扩增。特别适合对各种类型样品直接或简单裂解后进行PCR扩增,包括动物、植物、真菌、细菌、血液及细胞等各种样本,无需DNA纯化步骤,极大地缩短了实验时长、节约成本。简单裂解可使用碱裂解或蛋白酶K裂解方法,如选用蛋白酶K裂解方法,可选用本公司产品Lysis Buffer for PCR(Code No. AG12306和AG12307)。同时,本产品具有较快的延伸速度(~20 sec / kb),可在较短时间内获得检测结果。
进行PCR反应时,只需向预混液中加入模板、引物和水即可进行扩增;同时本产品中还加入了电泳检测时所需的色素试剂,溶液呈现紫红色;PCR 反应完毕后可以直接进行琼脂糖凝胶电泳。这种预混液方案操作简便,可最大限度地减少人为误差。
本产品中还添加了在常温状态下能够抑制 DNA polymerase 活性的单克隆抗体,可以进行 Hot Start PCR,有效的抑制引物二聚体的形成及非特异性扩增。本产品扩增得到的PCR产物 3’端不含 A 碱基,因此不可直接用于 TA 克隆。
产品优势
① 本制品具有较强的扩增性能与广泛的模板适用性,适用于各种类型样本直接或简单裂解后进行 PCR 扩增;无需 DNA 纯化步骤,缩短实验时长、节约成本;直接以水稻叶片为模板,可扩增出长达 12 kb 的 DNA 片段。
② 本制品是 2 倍浓度的预混液,仅需添加模板、引物与水即可进行 PCR 扩增,操作简便,减少人为误差,大大提高了实验效率。
③ 本制品具有较快的延伸速度(~20 sec / kb),可在较短时间内获得检测结果。
④ 本制品中含有紫红色染料,PCR 结束后可直接进行琼脂糖凝胶电泳,无需添加电泳上样缓冲液,电泳时有一条浅紫红色指示带。
⑤ 优化的反应体系,对复杂模板的 PCR 扩增具有良好的适应性,对于高 GC 含量、高 AT 含量的模板都能进行有效的扩增。
产品组成
组分
规格
2X Universal Direct PCR Master Mix(dye plus)
500 μl × 6 pcs
保存与运输
保存温度:-20℃
运输温度:干冰或者 -20℃ 冰袋
示例一
采用本试剂盒直接扩增不同物种的血液(含 EDTA 抗凝血剂),都能获得很好的扩增效果。
电泳结果如下图所示:
示例二
采用本试剂盒直接扩增不同抗凝血剂保存的人血,都能获得很好的扩增效果。
电泳结果如下图所示:
示例三
采用本试剂盒直接扩增不同植物样本,都能获得很好的扩增效果。
电泳结果如下图所示:
示例四
将水稻叶片、菠菜叶片、鼠尾等材料用蛋白酶 K 法简单裂解 【使用本公司产品 Lysis Buffer for PCR(Code No. AG12306)】,酵母用碱裂解法简单裂解;并以裂解产物为模板,采用本试剂盒扩增不同的 DNA 片段,都能获得很好的扩增效果。