Cas9-NLS 核酸酶（10mg/ml）

本产品是将来源于野生型化脓性链球菌（S.pyogenes）Cas9 核酸内切酶的序列，在 N 端添加了一段核定位信号（NLS）修饰，并于大肠杆菌重组表达纯化获得的蛋白。本产品具有良好的体外剪切功能和体内基因编辑功能，可在向导 RNA（sgRNA）引导下，识别 NGG 的PAM 序列，结合双链 DNA 对其进行特异性切割，在距离目标 DNA 中 PAM 序列的上游约 3 个碱基处产生双链断裂。此外，本产品还具有crRNA 和 tracrRNA 依赖性，靶标 DNA 激活的反式 ssDNA 切割活性。

1. 切割效率高：NLS 定位确保 Cas9 蛋白高效进入细胞核 。
2. 脱靶效应低：Cas9 核酸酶的瞬时进入提高了切割的特异性。
3. 反式活性高：可用于高灵敏度、高特异性核酸检测。
4. 浓度高：可高倍稀释，减少甘油对体内实验的影响。
5. 活性稳定：反复冻融、低档振荡对剪切活性均无明显影响。
6. 时间短：无需转录和翻译。

保存温度：-20℃保存
运输温度：干冰运输或者-20℃冰袋运输

本产品具有特异性双链剪切 DNA 的性能，靶 DNA 全长约 700 bp，在设计的 sgRNA 引导下，本产品可对靶 DNA 进行双链剪切，从而会在凝胶上约 200 bp 和 500 bp 的位置形成两条带。（注：若要发生双链剪切，Cas9、sgRNA 和靶 DNA 三者缺一不可。）

将 0.5 μg 本产品和靶向 EGFP 位点的 sgRNA，使用 Lipofectamine^TM CRISPRMAX^TM Cas9 转染试剂（Invitrogen^TM）转染至 1.6×10⁵ 个表达 EGFP 的细胞内（12 孔板体系）。荧光显微镜结果中，实验组较空白对照组的绿色荧光会明显降低（如图 A 所示），在流式细胞仪15000 个细胞通量的计数下，实验组较空白对照组下降了 74.37% 的荧光细胞量（如图 B 所示）。实验结果均表明，Cas9-NLS Nuclease 在 sgRNA 的引导下，对 EGFP 位点产生了有效的基因编辑。