Hoechst 33342 染色液

本产品是一种基于 Hoechst 33342【2′-(4-乙氧基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)- 2,5′-双-1H-苯并咪唑三盐酸盐】的荧光染料，广泛应用于细胞成像技术中 DNA 和细胞核染色。其检测原理是 Hoechst 33342 能够渗透细胞膜与 dsDNA 的腺嘌呤-胸腺嘧啶 (A-T)小沟处结合，从而对细胞核染色。Hoechst 33342 本身荧光背景较低，与 dsDNA 结合后发出强烈的蓝色荧光（最大激发光与发射光分别为 Ex = 350 nm，Em = 461 nm）。Hoechst 33342 染色常用于细胞凋亡检测，染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342 也常用于普通的细胞核染色，或常规的 DNA 染色。本产品操作简单，仅需将 Hoechst 33342 溶液稀释至合适浓度后覆盖样本，孵育一定时间后即可观察到明亮的蓝色荧光。
本产品可广泛用于活细胞、固定细胞或组织、石蜡切片的细胞核染色以及细胞凋亡和细胞周期分析。

1. 本产品是即用型染料，操作简单，染色固定细胞或石蜡切片样本时可用 PBS 或细胞培养液将其稀释至工作浓度（0.5~10 μg / ml），加入至细胞中，室温孵育一定时间即可观察；染色活细胞时，该溶液可直接按照一定比例加至细胞培养液中，无需收集细胞，也无需洗涤细胞，37℃孵育一定时间即可观察。
2. 本产品可渗透细胞膜，对细胞毒性较低，适用于活细胞、固定细胞或组织、石蜡切片等多种样本的细胞核染色实验以及细胞凋亡检测。
3. 酚红和血清对 Hoechst 33342 染色无影响。

在 12 孔细胞培养板中提前一天接种 Hela 细胞，24 h 后用 10 μg / ml 的 Hoechst 33342 染色工作液进行染色，结果如下图所示，细胞核呈现蓝色荧光。

用 1 ml 的 Hoechst 33342 染色工作液（10 μg / ml）染色 1×10⁶ 个 Jurkat 活细胞，37℃ 孵育 10 min，结果如下图所示，活细胞呈现淡蓝色荧光，其中含有的部分早期凋亡细胞呈现亮蓝色（红色箭头所指为正常活细胞，白色箭头所指为凋亡细胞）。