2X 预混型探针法 qPCR 试剂盒 II（含 UNG）

2X 预混型探针法 qPCR 试剂盒 II（含 UNG）

产品货号：CM0213

¥400

产品描述

本产品是一种 2X Premix 预混液，只需加入引物、探针、模板和水即可进行反应，操作非常简单。
本产品含有反应性能优越的 Accurate Taq HS DNA 聚合酶，配合精心优化的反应 Buffer，提高了 PCR 扩增性能及低浓度模板检测灵敏度，可以进行高灵敏度的 Real Time qPCR 反应，对靶基因进行准确定量检测, 同时可支持引物探针提前预混。
本产品中引入了 dUTP / UNG 防污染系统，在 PCR 反应过程中以 dUTP 取代 dTTP，利用 UNG 酶能选择性水解含 dU 的 DNA 链，而对不含dU 的 DNA 链没有任何影响的特性，除去 PCR 反应体系配制过程中引入的含 dU 的污染模板，从而可有效防止 PCR 假阳性结果的产生；同时，本产品中还添加了在常温状态下能够抑制 DNA Polymerase 活性的单克隆抗体，能够有效抑制非特异性扩增，提高反应灵敏度，提升结果准确性。

 

产品优势

1. 本产品是一种 2X 预混液，反应液配制十分简单，仅需加入引物、模板、探针及水即可进行 qPCR 反应。
2. 本产品采用了性能优越的 Accurate Taq HS DNA 聚合酶及优化的反应体系，具有特异性强、扩增效率高的特性。
3. 本产品支持引物探针提前预混。
4. 本产品中引入了 dUTP / UNG 防污染系统，可除去含 dU 的 PCR 产物污染，从而有效防止出现 PCR 假阳性结果，提升实验结果的准确性。

产品组成
组分 规格
2X Accurate Taq HS Probe Premix II (UNG Plus) 1 ml

 

保存与运输
保存温度：-20℃保存
运输温度：干冰运输或者-20℃冰袋运输
示例一

提前 预混引物探针 预混引物探针 37 ℃ 加速 5 天稳定性
以 Human cDNA（100 ng ~ 1 pg）为模板，以 RNase free water 代替模板量作为阴性对照，预混引物探针后在 37℃ 放置 5 天的加速样品和未处理样品同时进行三重检测，分别检测 TFR 基因（GC 含量为 38%，FAM 通道）、Actin 基因（GC 含量为 59%，HEX 通道）、RPP30 基因（GC 含量为 62%，Cy5 通道）。37℃ 放置 5 天的加速样品品（绿色曲线）的性能和未处理样品（红色曲线）的性能相当。
检测所用的定量仪器为ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems，三重检测的结果如下图所示：


结果如上图所示：
1、可以在宽广的模板范围内进行准确的定量，100 ng ~ 1 pg cDNA 进行 qPCR 反应的扩增曲线呈现良好的线性关系;
2、阴性对照在 45 cycles 内没有检出;
3、预混引物探针后 37℃ 放置 5 天扩增该基因与未处理样品性能相当。


结果如上图所示：
1、可以在宽广的模板范围内进行准确的定量，100 ng ~ 1 pg cDNA 进行 qPCR 反应的扩增曲线呈现良好的线性关系；
2、阴性对照在 45 cycles 内没有检出;
3、预混引物探针后 37℃ 放置 5 天扩增该基因与未处理样品性能相当。


结果如上图所示：
1、可以在宽广的模板范围内进行准确的定量，100 ng ~ 1 pg cDNA 进行 qPCR 反应的扩增曲线呈现良好的线性关系；
2、阴性对照在 45 cycles 内没有检出;
3、预混引物探针后 37℃ 放置 5 天扩增该基因与未处理样品性能相当。

示例二

支持快速程序

以非洲猪瘟 B646L 标准物质 [ GBW ( E ) 091034 ]为模板，使用本产品进行荧光探针 qPCR 方法检测 B646L 基因，25 μl 反应体系中模板加入量为 35 copies、0 copies（阴性对照）。同时配制后分别进行标准程序及快速程序，所用定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。程序如下：

实验结果如下：

结果如上图所示：
1、对于低拷贝的病毒模板，标准模式与快速模式不同复孔 ct 均值的差值 △ct＜0.5，且出值率相当；
2、阴性对照在 45 cycles 内没有检出。

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