SpecIdent 牛源性成分鉴定试剂盒(探针法)

产品货号:AG11751

¥1,000

产品描述

本产品是使用探针法快速鉴定牛*1 源性成分的试剂盒。基于动物种间 16S rRNA(16S ribosomal RNA)基因多态性进行动物源性成分鉴定。本产品中含有三种不同荧光基团(FAM、VIC、ROX)标记的探针,在同一反应管内可同步检测牛源性 16S rRNA 基因*2、真核生物 18S rRNA(18S ribosomal RNA)基因*3 以及内参照基因(Internal Control),通过检测内参照基因,可以监控反应是否正常进行。检测 18S rRNA 基因,可监控真核生物基因组 DNA 提取质量。
本产品中 2X Master Mix for Bovine 已混有 DNA 聚合酶、dNTP Mixture 与反应 buffer,反应液配制十分简单,只需加入本产品中的 Primer Mix for Bovine、Probe Mix for Bovine、RNase free water 以及加入待检样本即可进行牛源性成分的鉴定。
本产品 PCR 反应体系进行了优化,采用了反应性能优越的 Pro Taq HS 体系(混合了 Taq 抗体),能够有效抑制非特异性扩增,同时配合精心优化的 buffer,提高 PCR 扩增效率,可以进行高灵敏度的 Real Time PCR 反应。
* 1:本产品可对常见牛的品种进行检出,如普通牛 ( Bos taurus ),由于不同品种的牛的序列可能存在变异,因此某些品种的牛可能无法被准确检出。
* 2:本产品中 16S rRNA 基因能特异性检测牛源性成分,引物探针序列参考自《中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3309-2018》。
* 3:本产品中 18S rRNA 基因能特异性检测真核生物,引物探针序列参考自《中华人民共和国国家标准GB/T 38164-2019》。

产品优势

① 本产品将 DNA 聚合酶、dNTP Mixture 与反应 buffer 等试剂配制成一管,操作简单、快捷,可有效降低实验操作过程造成的样品污染的风险,缩短实验所需时间。
② 本产品采用了性能优越的 Pro Taq HS 及优化的反应体系,具有特异性强、扩增效率高的特性。
③ 本产品可在一管内同步检测牛源性 16S rRNA 基因、真核生物 18S rRNA 基因及 Internal Control,可特异性鉴定牛源性成分。

产品组成
组分 规格
2X Master Mix for Bovine*1 625 μl
Primer Mix for Bovine*2 50 μl
Probe Mix for Bovine*3 50 μl
Control DNA for Bovine*4 25 μl
RNase free water 1 ml

*1:2X Master Mix for Bovine 含有 Pro Taq HS DNA Polymerase、dNTP Mixture 与反应 buffer 等。
*2:Primer Mix for Bovine 含有牛源性 16S rRNA 基因、真核生物 18S rRNA 基因、Internal Control 检测用引物及 Internal Control 模板。
*3:Probe Mix for Bovine 含有牛源性 16S rRNA 基因、真核生物 18S rRNA 基因、Internal Control 检测用探针,需避光保存。
*4:Control DNA for Bovine 为仅含有牛源性成分特异性序列的质粒模板。

保存与运输
保存温度:-20℃保存
运输温度:干冰运输或-20℃冰袋运输

使用本产品对 Bovine gDNA 进行三重检测,分别检测牛源性 16S rRNA 基因(FAM 通道)、真核生物 18S rRNA 基因(ROX 通道)、Internal Control 基因(VIC 通道)。所用定量仪器为 ABI QuantStudioTM 5 Real-Time PCR Systems。实验组别如下表:

Group Template
Sample 1 10 ng Bovine gDNA
Sample 2 1 ng Bovine gDNA
Sample 3 100 pg Bovine gDNA
Sample 4 10 pg Bovine gDNA
Sample 5 1 pg Bovine gDNA
Negative Control 用 RNase free water 代替模板
Positive Control Control DNA for Bovine

1) Sample 组与 Negative Control 组实验结果如下:



牛源性 16S rRNA 检测结果如上图所示:
1、 扩增效率为 92%,R2=0.9990;
2、 可以在宽广的模板范围内进行准确的定量,10 ng-1 pg gDNA 进行 qPCR 反应的扩增曲线呈现良好的线性关系;
3、 Negative Control 在 45 cycles 内没有检出。



真核生物 18S rRNA 检测结果如上图所示:
1、扩增效率为 112%,R2=0.9992;
2、可以在宽广的模板范围内进行准确的定量,10 ng-1 pg gDNA 进行 qPCR 反应的扩增曲线呈现良好的线性关系;
3、Negative Control在45 cycles 内没有检出。



Internal Control 检测结果如上图所示:每个反应孔均正常检出。

 

2) Positive Control 组实验结果如下:



牛源性 16S rRNA 检测结果如上图所示:1、Positive Control 能获得良好的扩增;



真核生物 18S rRNA 检测结果如上图所示:1、Negative Control 在 45 cycles 内没有检出。



Internal Control 结果如上图所示:反应孔正常检出。