AdeptTect 植物快速直接 PCR 预混液(含染料)

产品货号:AG12305

¥600

产品描述

本制品是用于植物直接 PCR 反应的 2 倍浓度预混型试剂,具有较快的延伸速度(可达 10 sec / kb),可进行快速 PCR 反应。同时,本制品有较强的扩增性能,非常适合对各种植物样品直接或简单裂解后进行 PCR 扩增,无需 DNA 纯化步骤,极大地缩短了实验时长、节约成本。简单裂解可使用碱裂解或蛋白酶 K 裂解方法,如选用蛋白酶 K 裂解方法,可选用本公司产品 Lysis Buffer for PCR(Code No. AG12306 和 AG12307)。
进行 PCR 反应时,只需向预混液中加入模板、引物和水即可进行扩增;本制品中含有电泳所必需的色素试剂,制品溶液呈现鲜艳的绿色;PCR 反应完毕后可以直接进行琼脂糖凝胶电泳。这种预混液方案操作简便,可最大限度地减少人为误差,并在较短时间内即可获得检测结果。
本制品中还添加了在常温状态下能够抑制 DNA polymerase 活性的单克隆抗体,可以进行 Hot Start PCR,有效的抑制引物二聚体的形成及非特异性扩增。本制品扩增得到的产物 3’ 端不含 A 碱基,因此不可直接用于 TA 克隆。

产品优势

① 本制品具有较强的扩增性能,适用于各种植物样本直接或简单裂解后进行 PCR 扩增;无需 DNA 纯化步骤,缩短实验时长、节约成本。直接以水稻叶片为模板,可扩增出长达 12 kb 的 DNA 片段。
② 本制品具有较快的延伸速度(可达 10 sec / kb),在较短时间内即可获得检测结果。
③ 本制品是 2 倍浓度的预混液,仅需添加模板、引物与水即可进行 PCR 扩增,操作简便,减少人为误差,大大提高了实验效率。
④ 本制品中含有绿色染料,PCR 结束后可直接进行琼脂糖凝胶电泳,无需添加电泳上样缓冲液,电泳时有两条指示带(蓝色和黄色)。

产品组成
组分 规格
2X Plant Fast Direct PCR Master Mix(dye plus) 500 μl × 6 pc
保存与运输
保存温度:-20℃
运输温度:干冰或者 -20℃ 冰袋
示例一

采用本试剂盒对西红柿、水稻叶片样本直接进行 PCR 扩增,可获得较好的扩增效果。

*:西红柿 0.6 kb、1.6 kb 延伸速度 10 sec / kb;3 kb延伸速度 30 sec / kb;
*:水稻叶片 1.1 kb、3 kb、5 kb 延伸速度 10 sec / kb;7.5 kb、12 kb 延伸速度 20 sec / kb。

电泳结果如下图所示:

示例二

将菠菜叶片、水稻叶片、土豆块茎等用蛋白酶 K 法简单裂解 【使用本公司产品 Lysis Buffer for PCR(Code No. AG12306)】,并以裂解产物为模板,采用本试剂盒扩增不同的 DNA 片段,都能获得很好的扩增效果。

电泳结果如下图所示:

实验例表
模板类型 扩增速度 片段大小 序列 GC 含量 简单裂解 直接 PCR
裂解后的模板量*2 能否扩增*1 直接模板量*1 能否扩增*1
水稻叶片 10 sec / kb 1 kb 45.6% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
水稻叶片 10 sec / kb 3 kb 41.5% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
水稻叶片 15 sec / kb 5 kb 40.5% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
水稻叶片 20 sec / kb 7.5 kb 46.8% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
水稻叶片 20 sec / kb 12 kb 44.6% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
土豆块茎 10 sec / kb 1.3 kb 39.5% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 块茎简单裂解)
5-10 mm3
土豆块茎 15 sec / kb 2 kb 39.6% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 块茎简单裂解)
5-10 mm3
土豆块茎 15 sec / kb 2.9 kb 38.2% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 块茎简单裂解)
5-10 mm3
土豆块茎 15 sec / kb 5.8 kb 35.4% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 块茎简单裂解)
5-10 mm3
土豆块茎 30 sec / kb 10 kb 38.0% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 块茎简单裂解)
5-10 mm3
菠菜叶片 10 sec / kb 0.7 kb 38.9% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
菠菜叶片 10 sec / kb 1 kb 42.3% 2-4 μl裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
菠菜叶片 15 sec / kb 5 kb 33.4% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
菠菜叶片 15 sec / kb 10 kb 35.1% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
4-10 mm2
西红柿果肉 10 sec / kb 0.5 kb 28.2% 2-4 μl 裂解液
(2 μl 果肉简单裂解)
2 μl
西红柿果肉 10 sec / kb 1.6 kb 32.2% 2-4 μl 裂解液
(2 μl 果肉简单裂解)
2 μl
西红柿果肉 10 sec / kb 1.9 kb 36.0% 2-4 μl 裂解液
(2 μl 果肉简单裂解)
× ×
西红柿果肉 15 sec / kb 3 kb 37.4% 2-4 μl 裂解液
(2 μl 果肉简单裂解)
2 μl
西红柿果肉 20 sec / kb 4.4 kb 37.6% 2-4 μl 裂解液
(2 μl 果肉简单裂解)
2 μl
西红柿果肉 20 sec / kb 5 kb 38.2% 2-4 μl 裂解液
(2 μl 果肉简单裂解)
2 μl
西红柿果肉 30 sec / kb 5.8 kb 37.6% 2-4 μl 裂解液
(2 μl 果肉简单裂解)
× ×
拟南芥叶片 24 sec / kb 2.2 kb 35.2% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
/ /
拟南芥叶片 24 sec / kb 3 kb 41.0% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
/ /
拟南芥叶片 24 sec / kb 5 kb 38.0% 2-4 μl 裂解液
(4-10 mm2 叶片简单裂解)
/ /
玉米粒 15 sec / kb  1 kb 52.4% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 胚组织简单裂解)
× ×
玉米粒 20 sec / kb 1.8 kb 48.0% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 胚组织简单裂解)
× ×
玉米粒 15 sec / kb 3 kb 56.0% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 胚组织简单裂解)
× ×
玉米粒 15 sec / kb 4.4 kb 55.0% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 胚组织简单裂解)
× ×
玉米粒 15 sec / kb 5.7 kb 58.4% 2-4 μl 裂解液
(5-10 mm3 胚组织简单裂解)
× ×

*1:√表示能够扩增,× 表示未扩增出目的条带,/ 表示未进行扩增。
*2:简单裂解使用本公司制品 Lysis Buffer for PCR(Code. AG12306)。