Evo M-MLV 反转录预混型示踪试剂盒（含去除 gDNA 试剂，用于qPCR，黄色）

产品货号：AG11734

¥1,500

产品描述

本产品是利用 M-MLV 反转录聚合酶的反转录试剂盒，cDNA 产物可直接用于 qPCR 检测。该制品中 5X gDNA Clean Reaction Mix 可去除残留的基因组 DNA，保证定量结果的准确性；5X Evo M-MLV RT Reaction Mix（Yellow）含有黄色染料，能实现反转录移液可视化，避免漏加试剂，且该试剂包含反转录反应所需的所有组分，并针对 Oligo dT (18T) Primer、 Random 6 mers Primer 用量进行了优化，使反转录产物兼容嵌合法和探针法 qPCR 分析，能够进行高效的基因表达分析。

5X Evo M-MLV RT Reaction Mix（Yellow）含有黄色染料，反转录获得的 cDNA 呈现黄色，可搭配不同定量试剂使用：

① 可以搭配添加了蓝色染料的 SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR Tracking Kit（Code. AG11733）使用，避免移液错误，实现模板移液过程可视化：将本制品反转录获得的 cDNA（黄色）加入至蓝色的 qPCR 反应液中，溶液会变成绿色，可根据颜色变化确认是否添加模板，有利于大量样品的加样，减少了误操作概率。
② 可搭配本公司其他的定量试剂使用【如 SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR Kit （Code. AG11701）】，当黄色 cDNA 加入至无色定量试剂中，会变成浅黄色，可实现移液可视化。但若 cDNA 原液加入量较少，颜色变化不明显，可能会无法辨别。
③ 其他公司定量产品搭配本品使用性能未经验证，如需使用，请先测试性能。

产品优势

① 本制品含有黄色染料，反转时可实现移液可视化。
② 反转录获得的 cDNA 呈现黄色：可搭配蓝色的 SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR Tracking Kit（Code. AG11733）使用，实现模板移液过程可视化，避免移液错误，提高加样效率，降低误操作概率。也可搭配本公司其他定量试剂使用。
③ 含有基因组 DNA 去除试剂 5X gDNA Clean Reaction Mix，能够快速的去除 RNA 模板中混有的基因组 DNA。
④ 本试剂盒将去除基因组及反转录体系分别配制成预混液，使用方便，可减少试剂损失及实验误差。
⑤ 本制品反转得到的 cDNA 同时可以适用于 SYBR 法和探针法 qPCR 分析。

产品组成
组分 规格
5X gDNA Clean Reaction Mix 200 μl
5X Evo M-MLV RT Reaction Mix（Yellow）*1 400 μl
RNase free water 1 ml x 2 pc

*1：含有 Evo M-MLV RTase、RNase Inhibitor、dNTPs、Oligo dT (18T) Primer、Random 6 mers Primer 和黄色染料。

保存与运输
保存温度：-20℃
运输温度：干冰或者 -20℃ 冰袋
示例一

以小鼠肝脏 Total RNA（100 ng ~1 pg）为模板，使用本试剂盒去除基因组 DNA，然后进行反转录实验，并以此 cDNA 为模板，取 2 μl 的 cDNA 原液，用 SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR Tracking Kit（Code. AG11733）进行 qPCR 扩增检测 APOE 1 基因。所用定量仪器：CFX96 Real-Time PCR Detection System。结果如下：

结果如上图所示：
① 工作曲线 R2=0.998，扩增效率为 99.9%；
② 本制品的反转效率高，能在宽广的模板范围内进行准确的定量，100 ng ~ 1 pg Total RNA 反转录获得的 cDNA 扩增曲线呈现良好的线性关系。
③ 熔解曲线峰型单一，扩增特异性好。

示例二

以 293T 细胞 Total RNA（100 ng ~10 pg）为模板，使用本试剂盒去除基因组 DNA，然后进行反转录实验，并以此 cDNA 为模板，取 2 μl 的 cDNA 原液，用 SYBR Green Premix Pro Taq HS qPCR Tracking Kit （Code. AG11733）进行 qPCR 扩增检测β-actin基因。所用定量仪器：CFX96 Real-Time PCR Detection System。结果如下：

结果如上图所示：
① 工作曲线 R2=0.998，扩增效率是 93.4%。
② 本制品的反转效率高，能在宽广的模板范围内进行准确的定量，100 ng ~ 10 pg Total RNA 反转录获得的 cDNA 扩增曲线呈现良好的线性关系。
③ 熔解曲线峰型单一，扩增特异性好。

 

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